园艺学报 ›› 2025, Vol. 52 ›› Issue (6): 1412-1426.doi: 10.16420/j.issn.0513-353x.2024-0603
杨春梅1, 于洋1, 丁雨格1, 夏京1, 周玲2,*(), 彭磊1,*(
)
收稿日期:
2024-11-11
修回日期:
2025-02-24
出版日期:
2025-06-20
发布日期:
2025-06-20
通讯作者:
基金资助:
YANG Chunmei1, YU Yang1, DING Yuge1, XIA Jing1, ZHOU Ling2,*(), and PENG Lei1,*(
)
Received:
2024-11-11
Revised:
2025-02-24
Published:
2025-06-20
Online:
2025-06-20
摘要: 摘除杧果顶部花序可促进腋芽向花芽转化,推迟植株开花时间,从而避免“倒春寒”的危害。测定摘除‘贵妃’杧果顶部花芽后腋芽分化为花芽期间的转录组和代谢组数据,联合分析腋芽发育过程中淀粉与蔗糖代谢途径的差异基因和差异代谢物,明确其时空动态变化和表达模式。结果显示:在腋芽转化花芽阶段,共筛选出淀粉与蔗糖代谢相关差异基因76个,涉及17种酶;共鉴定出5种差异代谢物;摘除顶花芽后SUS(LOC123200616)、FRK(LOC123221640)、TPP(LOC123202828)表达上调;AMY(LOC123229947)下调,4个基因的表达趋势与转录组分析一致。以上结果表明:花芽分化对于糖的转化利用具有种类偏向性,主要依赖蔗糖和葡萄糖-6-磷酸的转化利用;D-果糖和α,α-海藻糖在特定时期能诱导成花。提示控制腋芽不同糖类的比例有利于调控杧果花期。
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基因ID Gene ID | 基因名称 Gene name | 引物序列(5′-3′)Primer sequence | |
---|---|---|---|
F | R | ||
LOC123200616 | SUS | CACACTGCTTTCACGCTTCC | CGGCGTGGAAAGATTTGAGC |
LOC123221640 | FRK | TGGTGAGCGTGAGTTCATGT | TCTGCCATGTCCCAAATGCT |
LOC123202828 | TPP | CACCCCGTCCAACTCTTCTC | GCATTGGCTTTGGTTCCTCC |
LOC123229947 | AMY | AAAGGCTATGCCCCAAGTGT | ATCTCCACAACTCCCCTTGC |
内参 Reference | Actin | ATCGCTGAGCACCTTCCAACA | CCAATCCTGACCTCTGACACTTCT |
表1 荧光定量 PCR分析淀粉与蔗糖代谢相关基因表达量的引物
Table 1 Primers for qRT- PCR analysis of the expression of genes related to starch and sucrose metabolism
基因ID Gene ID | 基因名称 Gene name | 引物序列(5′-3′)Primer sequence | |
---|---|---|---|
F | R | ||
LOC123200616 | SUS | CACACTGCTTTCACGCTTCC | CGGCGTGGAAAGATTTGAGC |
LOC123221640 | FRK | TGGTGAGCGTGAGTTCATGT | TCTGCCATGTCCCAAATGCT |
LOC123202828 | TPP | CACCCCGTCCAACTCTTCTC | GCATTGGCTTTGGTTCCTCC |
LOC123229947 | AMY | AAAGGCTATGCCCCAAGTGT | ATCTCCACAACTCCCCTTGC |
内参 Reference | Actin | ATCGCTGAGCACCTTCCAACA | CCAATCCTGACCTCTGACACTTCT |
样本 Sample | 有效读数 Clean reads | 总匹配数(匹配率) Total mapped | 多匹配数(匹配率) Multiple mapped | 单一匹配数(匹配率) Uniquely mapped | 碱基质量值/% Q30 |
---|---|---|---|---|---|
CKE_1 | 40 132 108 | 35 567 452(88.63%) | 1 747 958(4.91%) | 33 819 494(95.09%) | 94.40 |
CKE_2 | 39 276 406 | 35 205 966(89.64%) | 1 716 699(4.88%) | 33 489 267(95.12%) | 94.93 |
CKE_3 | 40 485 362 | 35 292 583(87.17%) | 1 699 743(4.82%) | 33 592 840(95.18%) | 93.70 |
CKM_1 | 41 383 850 | 37 761 770(91.25%) | 1 925 421(5.10%) | 35 836 349(94.90%) | 94.40 |
CKM_2 | 40 886 828 | 36 798 478(90.00%) | 1 883 395(5.12%) | 34 915 083(94.88%) | 93.91 |
CKM_3 | 42 596 182 | 38 891 243(91.30%) | 1 974 166(5.08%) | 36 917 077(94.92%) | 93.94 |
CKL_1 | 40 993 586 | 37 515 798(91.52%) | 1 894 802(5.05%) | 35 620 996(94.95%) | 94.88 |
CKL_2 | 39 666 702 | 35 645 715(89.86%) | 1 786 823(5.01%) | 33 858 892(94.99%) | 94.53 |
CKL_3 | 39 900 316 | 36 084 139(90.44%) | 1 815 659(5.03%) | 34 268 480(94.97%) | 94.38 |
TE_1 | 36 933 854 | 33 811 385(91.55%) | 1 655 842(4.90%) | 32 155 543(95.10%) | 94.57 |
TE_2 | 45 905 974 | 42 436 755(92.44%) | 2 037 917(4.80%) | 40 398 838(95.20%) | 94.55 |
TE_3 | 38 386 464 | 34 936 793(91.01%) | 1 746 121(5.00%) | 33 190 672(95.00%) | 94.84 |
TM_1 | 41 574 728 | 38 301 057(92.13%) | 1 898 306(4.96%) | 36 402 751(95.04%) | 94.04 |
TM_2 | 38 726 364 | 36 138 605(93.32%) | 1 768 620(4.89%) | 34 369 985(95.11%) | 94.88 |
TM_3 | 42 622 328 | 39 917 068(93.65%) | 1 941 548(4.86%) | 37 975 520(95.14%) | 93.63 |
TL_1 | 41 846 734 | 38 980 907(93.15%) | 1 921 047(4.93%) | 37 059 860(95.07%) | 94.43 |
TL_2 | 42 676 458 | 39 983 610(93.69%) | 1 881 440(4.71%) | 38 102 170(95.29%) | 93.98 |
TL_3 | 45 793 468 | 42 863 554(93.60%) | 2 052 569(4.79%) | 40 810 985(95.21%) | 93.84 |
表2 杧果腋芽转化花芽不同时期转录组测序数据评估统计结果
Table 2 Statistical results of transcriptome sequencing data evaluation at different periods of axillary bud conversion to flower bud in mango
样本 Sample | 有效读数 Clean reads | 总匹配数(匹配率) Total mapped | 多匹配数(匹配率) Multiple mapped | 单一匹配数(匹配率) Uniquely mapped | 碱基质量值/% Q30 |
---|---|---|---|---|---|
CKE_1 | 40 132 108 | 35 567 452(88.63%) | 1 747 958(4.91%) | 33 819 494(95.09%) | 94.40 |
CKE_2 | 39 276 406 | 35 205 966(89.64%) | 1 716 699(4.88%) | 33 489 267(95.12%) | 94.93 |
CKE_3 | 40 485 362 | 35 292 583(87.17%) | 1 699 743(4.82%) | 33 592 840(95.18%) | 93.70 |
CKM_1 | 41 383 850 | 37 761 770(91.25%) | 1 925 421(5.10%) | 35 836 349(94.90%) | 94.40 |
CKM_2 | 40 886 828 | 36 798 478(90.00%) | 1 883 395(5.12%) | 34 915 083(94.88%) | 93.91 |
CKM_3 | 42 596 182 | 38 891 243(91.30%) | 1 974 166(5.08%) | 36 917 077(94.92%) | 93.94 |
CKL_1 | 40 993 586 | 37 515 798(91.52%) | 1 894 802(5.05%) | 35 620 996(94.95%) | 94.88 |
CKL_2 | 39 666 702 | 35 645 715(89.86%) | 1 786 823(5.01%) | 33 858 892(94.99%) | 94.53 |
CKL_3 | 39 900 316 | 36 084 139(90.44%) | 1 815 659(5.03%) | 34 268 480(94.97%) | 94.38 |
TE_1 | 36 933 854 | 33 811 385(91.55%) | 1 655 842(4.90%) | 32 155 543(95.10%) | 94.57 |
TE_2 | 45 905 974 | 42 436 755(92.44%) | 2 037 917(4.80%) | 40 398 838(95.20%) | 94.55 |
TE_3 | 38 386 464 | 34 936 793(91.01%) | 1 746 121(5.00%) | 33 190 672(95.00%) | 94.84 |
TM_1 | 41 574 728 | 38 301 057(92.13%) | 1 898 306(4.96%) | 36 402 751(95.04%) | 94.04 |
TM_2 | 38 726 364 | 36 138 605(93.32%) | 1 768 620(4.89%) | 34 369 985(95.11%) | 94.88 |
TM_3 | 42 622 328 | 39 917 068(93.65%) | 1 941 548(4.86%) | 37 975 520(95.14%) | 93.63 |
TL_1 | 41 846 734 | 38 980 907(93.15%) | 1 921 047(4.93%) | 37 059 860(95.07%) | 94.43 |
TL_2 | 42 676 458 | 39 983 610(93.69%) | 1 881 440(4.71%) | 38 102 170(95.29%) | 93.98 |
TL_3 | 45 793 468 | 42 863 554(93.60%) | 2 052 569(4.79%) | 40 810 985(95.21%) | 93.84 |
图2 杧果腋芽转化花芽3个时期的差异表达基因统计 CK:对照;T:摘除顶花芽处理。E、M、L:对应腋芽转变为花芽前期、中期和后期。下同
Fig.2 Statistics of differentially expressed genes at three stages of axillary bud conversion to flower bud in mango CK:Control;T:Treatment with removal of apical flower buds. E,M,L:Corresponding to the early,middle and late stages of axillary bud transformation into flower buds. The same below
图3 杧果摘除顶花芽后腋芽转化花芽中差异表达基因KEGG pathway富集分析
Fig. 3 Enrichment analysis of KEGG pathway for differentially expressed genes in axillary bud transformed flower buds after apical bud removal in mango
图 5 淀粉与蔗糖代谢转录组和代谢组联合分析 CK1、CK2、CK3对应CKE、CKM、CKL;T1、T2、T3对应TE、TM、TL。蔗糖合酶(SUS);蔗糖转化酶(INV);内切β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-GLU);内切葡聚糖酶(EG);葡萄糖-1-磷酸腺苷转移酶(AGPS1);海藻糖-6-磷酸合酶(TPS);海藻糖-6-磷酸磷酸酶(TPP);颗粒结合淀粉合酶Ⅰ(CBSSⅠ);颗粒结合淀粉合酶Ⅱ(CBSSⅡ);果糖激酶(KHK);叶绿体异淀粉酶Ⅲ(ISA3);α-淀粉酶(AMY);β-淀粉酶(BMY);α-葡萄糖苷酶(α-GLU);β-葡萄糖苷酶(β-GLU);葡萄糖磷酸变位酶(PGM);糖原磷酸化酶(GP)
Fig. 5 Joint analysis of starch and sucrose metabolism in transcriptome and metabolome CK1,CK2,and CK3 correspond to CKE,CKM,and CKL;T1,T2,and T3 correspond to TE,TM,and TL.Sucrose synthase(SUS);β-fructofuranosidase(INV);Endo-1,3-β-glucanase(β-1,3-GLU);Endo-1,4-β-D-glucanohydrolase(EG);Glucose-1-phosphate adenylyltransferase(AGPS1);Trehalose-6-phosphate synthase(TPS);Trehalose 6-phosphate phosphatase(TPP);Granule-bound starch synthase Ⅰ(CBSSⅠ);Granule-bound starch synthase Ⅱ(CBSSⅡ);Fructokinase(KHK);Isoamylase Ⅲ,chloroplastic(ISA3);α-amylase(AMY);β-amylase(BMY);α-glucosidase(α-GLU);β-glucosidase(β-GLU);Phosphoglucomutase(PGM);Glycogen phosphorylase(GP)
代谢物 Metabolite | ID | 组别 Group | 相对含量 Relative content | 表达 Expressions | VIP | P值P value | ||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
CK | T | |||||||
D-葡萄糖-6-磷酸 D-glucose-6P | M259T80 | CKE vs. TE | 1.13E + 07 | 2.23E + 07 | 上调Up | 1.480151 | 0.025974026 | |
CKM vs. TM | 1.33E + 07 | 2.72E + 07 | 1.824720 | 0.004329004 | ||||
CKL vs. TL | 2.06E + 07 | 3.47E + 07 | 1.588965 | 0.004329004 | ||||
α,α-海藻糖 α,α-trehalose | M323T94 | CKE vs. TE | 4.33E + 06 | 8.08E + 06 | 上调Up | 1.825478 | 0.015151515 | |
CKL vs. TL | 6.14E + 06 | 9.95E + 06 | 1.318241 | 0.025974026 | ||||
D-果糖 D-fructose | M179T164 | CKM vs. TM | 6.09E + 07 | 1.26E + 08 | 上调Up | 1.441231 | 0.002164502 | |
蔗糖 Sucrose | M341T272 | CKE vs. TE | 1.98E + 07 | 1.13E + 07 | 下调Down | 1.651202 | 0.015151515 | |
CKM vs. TM | 2.24E + 07 | 7.81E + 06 | 1.694633 | 0.002164502 | ||||
CKL vs. TL | 2.07E + 07 | 8.99E + 06 | 1.683897 | 0.002164502 | ||||
蔗糖6’-磷酸Sucrose-6P | M423T97 | CKE vs. TE | 1.76E + 07 | 1.21E + 07 | 下调Down | 1.915860 | 0.008658009 |
表3 杧果腋芽转化花芽不同时期淀粉与蔗糖代谢中的差异代谢物表达
Table 3 Differential metabolite expression in starch and sucrose metabolism during different periods of axillary bud conversion to flower bud in mango
代谢物 Metabolite | ID | 组别 Group | 相对含量 Relative content | 表达 Expressions | VIP | P值P value | ||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|
CK | T | |||||||
D-葡萄糖-6-磷酸 D-glucose-6P | M259T80 | CKE vs. TE | 1.13E + 07 | 2.23E + 07 | 上调Up | 1.480151 | 0.025974026 | |
CKM vs. TM | 1.33E + 07 | 2.72E + 07 | 1.824720 | 0.004329004 | ||||
CKL vs. TL | 2.06E + 07 | 3.47E + 07 | 1.588965 | 0.004329004 | ||||
α,α-海藻糖 α,α-trehalose | M323T94 | CKE vs. TE | 4.33E + 06 | 8.08E + 06 | 上调Up | 1.825478 | 0.015151515 | |
CKL vs. TL | 6.14E + 06 | 9.95E + 06 | 1.318241 | 0.025974026 | ||||
D-果糖 D-fructose | M179T164 | CKM vs. TM | 6.09E + 07 | 1.26E + 08 | 上调Up | 1.441231 | 0.002164502 | |
蔗糖 Sucrose | M341T272 | CKE vs. TE | 1.98E + 07 | 1.13E + 07 | 下调Down | 1.651202 | 0.015151515 | |
CKM vs. TM | 2.24E + 07 | 7.81E + 06 | 1.694633 | 0.002164502 | ||||
CKL vs. TL | 2.07E + 07 | 8.99E + 06 | 1.683897 | 0.002164502 | ||||
蔗糖6’-磷酸Sucrose-6P | M423T97 | CKE vs. TE | 1.76E + 07 | 1.21E + 07 | 下调Down | 1.915860 | 0.008658009 |
图 6 qPT-PCR验证4个差异基因在对照和处理的不同时期中的表达 显著性差异分析采用LSD多重比较,不同小写字母表示差异显著(P < 0.05)
Fig. 6 qPT-PCR to verify the expression of four differentially expressed genes in different periods of control and treatment Significant difference analysis was conducted using LSD multiple comparisons,with different lowercase letters indicate significant differences(P < 0.05)
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