 
            
        园艺学报 ›› 2025, Vol. 52 ›› Issue (1): 171-184.doi: 10.16420/j.issn.0513-353x.2023-0891
        
               		史兴秀1,2,*, 冯贝贝1,*, 闫鹏1,**( ), 耿文娟2,**(
), 耿文娟2,**( ), 朱玛孜拉·沙尔山木汗2
), 朱玛孜拉·沙尔山木汗2
                  
        
        
        
        
    
收稿日期:2024-05-17
									
				
											修回日期:2024-10-04
									
				
									
				
											出版日期:2025-01-25
									
				
											发布日期:2025-01-19
									
			通讯作者:
					作者简介:基金资助:
        
               		SHI  Xingxiu1,2, FENG  Beibei1, YAN  Peng1,**( ), GENG  Wenjuan2,**(
), GENG  Wenjuan2,**( ), Jumazira  Sharshanmukhan2
), Jumazira  Sharshanmukhan2
			  
			
			
			
                
        
    
Received:2024-05-17
									
				
											Revised:2024-10-04
									
				
									
				
											Published:2025-01-25
									
				
											Online:2025-01-19
									
			Contact:
					** E-mail:xaasyysyp@163.com,gwj0526@163.com   		     					     	
							摘要:
探究‘王林’苹果早期水心病发生过程中的细胞膜完整性以及细胞内各糖组分含量和分布,活性氧代谢及渗透调节物质含量的变化,分析山梨醇转运代谢基因MdSDH和MdSOT的表达量变化。结果表明,随着果实生长及环境温度升高,早期水心发生率上升,早期水心发生可能与高温相关。水心发生后,液泡、细胞质、细胞间隙的山梨醇含量高于果糖和葡萄糖含量,液泡膜透性与各细胞器中山梨醇含量显著相关,山梨醇含量始终较高,果糖含量下降显著,液泡膜和细胞膜对不同糖分的透性不同,超氧阴离子和过氧化氢含量较正常组织显著升高(高4.65%和20.83%),POD、SOD和CAT等抗氧化酶活性显著降低,MDA含量和相对电导率显著升高,膜质过氧化水平严重,但液泡膜和细胞膜仍保持一定透性;MdSOT4表达极显著上升,推测其可能对水心组织中的山梨醇转运以及代谢起重要的调节作用。10月气温降低,早期水心症状减轻,进一步说明高温与水心发生相关。
史兴秀, 冯贝贝, 闫鹏, 耿文娟, 朱玛孜拉·沙尔山木汗. ‘王林’苹果早期水心病发生过程中的相关生理变化[J]. 园艺学报, 2025, 52(1): 171-184.
SHI Xingxiu, FENG Beibei, YAN Peng, GENG Wenjuan, Jumazira Sharshanmukhan. Physiological Changes Associated with Early Watercore in‘Orin’Apples[J]. Acta Horticulturae Sinica, 2025, 52(1): 171-184.
| 基因名称 Gene name | 正向引物(5′-3′) Forward primer | 反向引物(5′-3′) Reverse primer | 
|---|---|---|
| MdSDH1 | TTGGAGGAAGGCGCGATG | CCTGCTCCCACGACCAAG | 
| MdSDH2 | ATCGGGCTGGTTTCCGTG | CGGGCCCGAGAGACTTTG | 
| MdSDH3 | CGGGCCCGAGAGACTTTG | AGCAATTGCCGCTTTGGTG | 
| MdSDH4 | CCCTGCGGATCTGTGCTT | GGCCCTGCTCCGATGATC | 
| MdSDH5 | TTGGAGGAAGGCGCGATG | CCTGCTCCCACGACCAAG | 
| MdSDH6 | TTAAAGAAGCCATGATCTCC | CCATTCCTACAAGGCAGAC | 
| MdSOT1 | GGCATCGGAGTCGGCTAC | AAGACGTGAGGAAGCCGC | 
| MdSOT2 | TCAAGGTCACGGACACGC | AGTTCTTCCGGCCATGGC | 
| MdSOT3 | ACCTTCCTCATGTGCGGC | AGACCTCGGCGCTGTAGA | 
| MdSOT4 | TCAAGGTCACGGACACGC | TTCTTCCTGCCATGGCGG | 
| MdSOT5 | TTGTCGTTGACGGGGCTC | GTCAGGCACAAAACGGCG | 
| MdSOT6 | ACCTTCCTCATGTGCGGC | AGACCTCGGCGCTGTAGA | 
| Actin1 | GGACAGCGAGGACATTCAGC | CTGACCCATTCCAACCATAACA | 
表1 所用引物序列
Table 1 Primer sequences used
| 基因名称 Gene name | 正向引物(5′-3′) Forward primer | 反向引物(5′-3′) Reverse primer | 
|---|---|---|
| MdSDH1 | TTGGAGGAAGGCGCGATG | CCTGCTCCCACGACCAAG | 
| MdSDH2 | ATCGGGCTGGTTTCCGTG | CGGGCCCGAGAGACTTTG | 
| MdSDH3 | CGGGCCCGAGAGACTTTG | AGCAATTGCCGCTTTGGTG | 
| MdSDH4 | CCCTGCGGATCTGTGCTT | GGCCCTGCTCCGATGATC | 
| MdSDH5 | TTGGAGGAAGGCGCGATG | CCTGCTCCCACGACCAAG | 
| MdSDH6 | TTAAAGAAGCCATGATCTCC | CCATTCCTACAAGGCAGAC | 
| MdSOT1 | GGCATCGGAGTCGGCTAC | AAGACGTGAGGAAGCCGC | 
| MdSOT2 | TCAAGGTCACGGACACGC | AGTTCTTCCGGCCATGGC | 
| MdSOT3 | ACCTTCCTCATGTGCGGC | AGACCTCGGCGCTGTAGA | 
| MdSOT4 | TCAAGGTCACGGACACGC | TTCTTCCTGCCATGGCGG | 
| MdSOT5 | TTGTCGTTGACGGGGCTC | GTCAGGCACAAAACGGCG | 
| MdSOT6 | ACCTTCCTCATGTGCGGC | AGACCTCGGCGCTGTAGA | 
| Actin1 | GGACAGCGAGGACATTCAGC | CTGACCCATTCCAACCATAACA | 
 
																													图3 ‘王林’苹果早期水心发生前(7月)后(8月)液泡、细胞质、细胞间隙和整个组织中的糖分含量 不同小写字母表示水心发生前后差异显著,P < 0.05
Fig. 3 Sugar content in vesicles,cytoplasm,intercellula space and whole tissue of‘Orin’apples before(July)and after(August)the onset of early watercore Different lowercase letters indicate significant differences before and after watercore occurrence,P < 0.05
| 样品 Sample | 液泡膜 Tonoplast (mg · g-1 · min-1) | ||
|---|---|---|---|
| 果糖 Fructose | 葡萄糖 Glucose | 山梨醇 Sorbitol | |
| 水心前 Before watercore | -0.0188 ± 0.014 a | -0.01627 ± 0.012 a | 6.3 × 10-5 ± 5.77 × 10-5 b | 
| 水心 Watercore | 0.0054 ± 0.009 a | 0.00180 ± 0.0037 a | 0.01386 ± 0.0026 a | 
| 样品 Sample | 细胞膜 Plasma membrane (mg · g-1 · min-1) | ||
| 果糖 Fructose | 葡萄糖 Glucose | 山梨醇 Sorbitol | |
| 水心前 Before watercore | 0.0082 ± 0.0064 a | 0.0267 ± 0.01137 a | -7.33 × 10-5 ± 3.06 × 10-5 b | 
| 水心 Watercore | -0.0013 ± 0.0237 a | 0.01113 ± 0.0097 a | 0.0032 ± 0.0008 a | 
表2 ‘王林’苹果早期水心前(7月)后(8月)果实液泡膜和细胞膜的糖组分渗透速率
Table 2 Permeability rates of sugar fractions in the tonoplast and plasma membrane of‘Orin’apples before(July)and after(August)early watecore fruiting
| 样品 Sample | 液泡膜 Tonoplast (mg · g-1 · min-1) | ||
|---|---|---|---|
| 果糖 Fructose | 葡萄糖 Glucose | 山梨醇 Sorbitol | |
| 水心前 Before watercore | -0.0188 ± 0.014 a | -0.01627 ± 0.012 a | 6.3 × 10-5 ± 5.77 × 10-5 b | 
| 水心 Watercore | 0.0054 ± 0.009 a | 0.00180 ± 0.0037 a | 0.01386 ± 0.0026 a | 
| 样品 Sample | 细胞膜 Plasma membrane (mg · g-1 · min-1) | ||
| 果糖 Fructose | 葡萄糖 Glucose | 山梨醇 Sorbitol | |
| 水心前 Before watercore | 0.0082 ± 0.0064 a | 0.0267 ± 0.01137 a | -7.33 × 10-5 ± 3.06 × 10-5 b | 
| 水心 Watercore | -0.0013 ± 0.0237 a | 0.01113 ± 0.0097 a | 0.0032 ± 0.0008 a | 
| 样品Sample | 组织 Tissue | 液泡 Vacuole | 细胞质Cytoplasm | 细胞间隙 Free space | 整个组织 Whole tissue | 液泡膜Tonoplast | 
|---|---|---|---|---|---|---|
| 水心前 Before watercore | 细胞质Cytoplasm | 1.000** | ||||
| 细胞间隙Free space | 0.999* | 0.999* | ||||
| 整个组织Whole tissue | 1.000** | 1.000** | 1.000* | |||
| 液泡膜Tonoplast | 1.000** | 1.000** | 1.000* | 1.000** | ||
| 细胞膜Plasma membrane | -0.198 | -0.198 | -0.163 | -0.188 | -0.189 | |
| 水心 Watercore | 细胞质Cytoplasm | -0.276 | ||||
| 细胞间隙Free space | -0.833 | -0.302 | ||||
| 整个组织Whole tissue | -0.870 | 0.714 | 0.452 | |||
| 液泡膜Tonoplast | -0.853 | -0.267 | 0.999* | 0.484 | ||
| 细胞膜Plasma membrane | -0.926 | 0.619 | 0.562 | 0.992 | 0.592 | 
表3 ‘王林’苹果水心发生前(7月)后(8月)各个细胞器山梨醇含量与液泡膜、细胞膜渗透速率的相关性
Table 3 The correlation between sorbitol content in various organelles and the permeability rate of tonoplast and plasma membrane permeability before(July)and after(August)the occurrence of water core in‘Orin’apple
| 样品Sample | 组织 Tissue | 液泡 Vacuole | 细胞质Cytoplasm | 细胞间隙 Free space | 整个组织 Whole tissue | 液泡膜Tonoplast | 
|---|---|---|---|---|---|---|
| 水心前 Before watercore | 细胞质Cytoplasm | 1.000** | ||||
| 细胞间隙Free space | 0.999* | 0.999* | ||||
| 整个组织Whole tissue | 1.000** | 1.000** | 1.000* | |||
| 液泡膜Tonoplast | 1.000** | 1.000** | 1.000* | 1.000** | ||
| 细胞膜Plasma membrane | -0.198 | -0.198 | -0.163 | -0.188 | -0.189 | |
| 水心 Watercore | 细胞质Cytoplasm | -0.276 | ||||
| 细胞间隙Free space | -0.833 | -0.302 | ||||
| 整个组织Whole tissue | -0.870 | 0.714 | 0.452 | |||
| 液泡膜Tonoplast | -0.853 | -0.267 | 0.999* | 0.484 | ||
| 细胞膜Plasma membrane | -0.926 | 0.619 | 0.562 | 0.992 | 0.592 | 
| 果实 Fruit | 月份/组织 Month/tissue | 丙二醛含量/ (nmol · g-1) MDA content | 相对电导率/ Relative electrical conductivity | 超氧阴离子含量/ (μmol · g-1) Superoxide anion content | H2O2含量/ (μmol · g-1) | 
|---|---|---|---|---|---|
| 正常Normal | 7 | 23.21 ± 0.49 a | 43.91 ± 0.45 b | 5.57 ± 1.09 a | 8.97 ± 0.76 a | 
| 8 | 14.95 ± 0.27 b | 88.15 ± 1.36 a | 3.92 ± 0.66 b | 1.87 ± 0.29 c | |
| 10 | 6.07 ± 0.71 c | 37.54 ± 0.75 c | 2.35 ± 0.34 c | 7.53 ± 0.51 b | |
| 水心Watercore | 水心Watercore | 53.52 ± 5.15 a | 91.80 ± 0.96 a | 4.05 ± 0.07 a | 2.61 ± 0.08 a | 
| 正常Normal | 14.47 ± 0.85 b | 77.17 ± 1.64 b | 3.87 ± 0.16 b | 2.16 ± 0.16 b | 
表4 ‘王林’苹果水心与正常组织和果肉活性氧含量与膜质过氧化水平比较
Table 4 Comparison of active oxygen content and membrane peroxidation level between watercore and normal tissue and flesh of‘Orin’apple
| 果实 Fruit | 月份/组织 Month/tissue | 丙二醛含量/ (nmol · g-1) MDA content | 相对电导率/ Relative electrical conductivity | 超氧阴离子含量/ (μmol · g-1) Superoxide anion content | H2O2含量/ (μmol · g-1) | 
|---|---|---|---|---|---|
| 正常Normal | 7 | 23.21 ± 0.49 a | 43.91 ± 0.45 b | 5.57 ± 1.09 a | 8.97 ± 0.76 a | 
| 8 | 14.95 ± 0.27 b | 88.15 ± 1.36 a | 3.92 ± 0.66 b | 1.87 ± 0.29 c | |
| 10 | 6.07 ± 0.71 c | 37.54 ± 0.75 c | 2.35 ± 0.34 c | 7.53 ± 0.51 b | |
| 水心Watercore | 水心Watercore | 53.52 ± 5.15 a | 91.80 ± 0.96 a | 4.05 ± 0.07 a | 2.61 ± 0.08 a | 
| 正常Normal | 14.47 ± 0.85 b | 77.17 ± 1.64 b | 3.87 ± 0.16 b | 2.16 ± 0.16 b | 
| 果实 Fruit | 月份/组织 Month/tissue | SOD/(U · h-1 · g-1FW) | POD/(U · g-1) | CAT/(U · g-1) | APX/(U · g-1) | 
|---|---|---|---|---|---|
| 正常Normal | 7 | 24.36 ± 1.61 b | 301.61 ± 46.56 c | 548.51 ± 10.09 a | 0.87 ± 0.09 b | 
| 8 | 31.92 ± 8.13 a | 1 288.42 ± 233.29 a | 237.37 ± 11.59 b | 1.09 ± 0.13 a | |
| 10 | 27.66 ± 7.61 a | 779.52 ± 42.33 b | 235.42 ± 26.58 b | 0.68 ± 0.19 c | |
| 水心Watercore | 水心Watercore | 26.21 ± 1.67 b | 355.31 ± 28.91 b | 157.95 ± 6.57 b | 2.48 ± 0.08 a | 
| 正常Normal | 39.71 ± 6.61 a | 1 371.89 ± 303.47 a | 238.68 ± 12.45 a | 0.54 ± 0.03 b | 
表5 ‘王林’苹果水心与正常组织和果肉主要抗氧化酶活性比较
Table 5 Comparison of main antioxidant enzyme activities between watercore and watercore-free tissue tissue and flesh of‘Orin’apple
| 果实 Fruit | 月份/组织 Month/tissue | SOD/(U · h-1 · g-1FW) | POD/(U · g-1) | CAT/(U · g-1) | APX/(U · g-1) | 
|---|---|---|---|---|---|
| 正常Normal | 7 | 24.36 ± 1.61 b | 301.61 ± 46.56 c | 548.51 ± 10.09 a | 0.87 ± 0.09 b | 
| 8 | 31.92 ± 8.13 a | 1 288.42 ± 233.29 a | 237.37 ± 11.59 b | 1.09 ± 0.13 a | |
| 10 | 27.66 ± 7.61 a | 779.52 ± 42.33 b | 235.42 ± 26.58 b | 0.68 ± 0.19 c | |
| 水心Watercore | 水心Watercore | 26.21 ± 1.67 b | 355.31 ± 28.91 b | 157.95 ± 6.57 b | 2.48 ± 0.08 a | 
| 正常Normal | 39.71 ± 6.61 a | 1 371.89 ± 303.47 a | 238.68 ± 12.45 a | 0.54 ± 0.03 b | 
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