园艺学报 ›› 2025, Vol. 52 ›› Issue (12): 3189-3201.doi: 10.16420/j.issn.0513-353x.2025-0186
高旭1, 何道根1,*(
), 檀国印1, 朱长志1, 章红运2, 肖家睿2, 王辉3
收稿日期:2025-05-26
修回日期:2025-08-25
出版日期:2025-12-25
发布日期:2025-12-20
通讯作者:
基金资助:
GAO Xu1, HE Daogen1,*(
), TAN Guoyin1, ZHU Changzhi1, ZHANG Hongyun2, XIAO Jiarui2, WANG Hui3
Received:2025-05-26
Revised:2025-08-25
Published:2025-12-25
Online:2025-12-20
摘要:
以青花菜花球农艺性状差异显著的高代自交系B20101和B736为亲本,构建包括228个单株的F2分离群体,通过定位花球农艺性状相关QTL,挖掘相关候选基因,为解析青花菜花球形成的分子机制和选育优良新品种奠定理论基础。基于重测序技术开发SNP标记,构建了包含6 329个SNP标记的985个bin标记的遗传图谱。该遗传图谱总距为788.78 cM,平均图距为0.84 cM。对花球农艺性状进行QTL定位分析,分别检测到控制茎横径、球横径、球纵径、单球质量和蕾粒大小的QTL位点3、3、1、4和8个,其表型贡献率(PVE)介于4.5689% ~ 21.0997%。其中1个控制花球蕾粒大小的主效QTL位点(LOD = 10.6897,PVE = 21.0997%)被定位在SNP标记mk_18639516与mk_18698493界定的约58.977 kb区间内。通过分析该QTL区间,筛选出4个可能影响双亲花球蕾粒大小的候选基因,分别为Bo6g067260、Bo6g067270、Bo6g067280和Bo6g067290,在双亲中的表达水平存在显著差异,但其序列在双亲及F2群体中无差异。提示这4个基因的调控区(如启动子)序列可能有差异,导致基因表达量的差异,进而影响花球蕾粒的大小。
高旭, 何道根, 檀国印, 朱长志, 章红运, 肖家睿, 王辉. 青花菜花球性状相关QTL定位及其候选基因分析[J]. 园艺学报, 2025, 52(12): 3189-3201.
GAO Xu, HE Daogen, TAN Guoyin, ZHU Changzhi, ZHANG Hongyun, XIAO Jiarui, WANG Hui. QTL Mapping and Candidate Gene Analysis of Related Traits of Broccoli[J]. Acta Horticulturae Sinica, 2025, 52(12): 3189-3201.
| 材料 Material | 茎横径/cm Bulb transverse diameter | 球横径/cm Curd transverse diameter | 球纵径/cm Curd longitudinal diameter | 单球质量/kg Single bulb weight of curd | 蕾粒大小/cm Bud grain size |
|---|---|---|---|---|---|
| B20101(♀) | 4.862 ± 0.054 a | 14.206 ± 0.208 b | 11.872 ± 0.322 a | 0.550 ± 0.021 a | 0.367 ± 0.003 a |
| B736(♂) | 4.001 ± 0.014 c | 15.079 ± 0.073 a | 8.973 ± 0.041 c | 0.335 ± 0.014 c | 0.155 ± 0.005 c |
| F1 | 4.569 ± 0.066 b | 14.927 ± 0.185 a | 9.917 ± 0.104 b | 0.483 ± 0.009 b | 0.214 ± 0.001 b |
表1 亲本和F1花球相关表型性状比较
Table 1 Comparison of phenotypic traits related to parents and F1 curds
| 材料 Material | 茎横径/cm Bulb transverse diameter | 球横径/cm Curd transverse diameter | 球纵径/cm Curd longitudinal diameter | 单球质量/kg Single bulb weight of curd | 蕾粒大小/cm Bud grain size |
|---|---|---|---|---|---|
| B20101(♀) | 4.862 ± 0.054 a | 14.206 ± 0.208 b | 11.872 ± 0.322 a | 0.550 ± 0.021 a | 0.367 ± 0.003 a |
| B736(♂) | 4.001 ± 0.014 c | 15.079 ± 0.073 a | 8.973 ± 0.041 c | 0.335 ± 0.014 c | 0.155 ± 0.005 c |
| F1 | 4.569 ± 0.066 b | 14.927 ± 0.185 a | 9.917 ± 0.104 b | 0.483 ± 0.009 b | 0.214 ± 0.001 b |
| 性状 Trait | 均值 ± 标准差 Mean ± standard deviation | 极大值 Maximum value | 极小值 Minimum value | 峰度 Kurtosis | 偏度 Skewness |
|---|---|---|---|---|---|
| 茎横径/cm Bulb transverse diameter | 4.622 ± 0.493 | 5.740 | 3.215 | -0.441 | -0.135 |
| 球横径/cm Curd transverse diameter | 15.024 ± 1.080 | 20.806 | 13.156 | 7.677 | 2.102 |
| 球纵径/cm Curd longitudinal diameter | 9.980 ± 0.950 | 13.609 | 8.014 | 0.926 | 0.718 |
| 单球质量/kg Single bulb weight of curd | 0.496 ± 0.095 | 0.855 | 0.295 | 1.278 | 0.598 |
| 蕾粒大小/cm Bud grain size | 0.232 ± 0.045 | 0.362 | 0.128 | 0.268 | 0.512 |
表2 F2群体花球相关表型性状分析
Table 2 Analysis of phenotypic characteristics related to flower balls in F2 population
| 性状 Trait | 均值 ± 标准差 Mean ± standard deviation | 极大值 Maximum value | 极小值 Minimum value | 峰度 Kurtosis | 偏度 Skewness |
|---|---|---|---|---|---|
| 茎横径/cm Bulb transverse diameter | 4.622 ± 0.493 | 5.740 | 3.215 | -0.441 | -0.135 |
| 球横径/cm Curd transverse diameter | 15.024 ± 1.080 | 20.806 | 13.156 | 7.677 | 2.102 |
| 球纵径/cm Curd longitudinal diameter | 9.980 ± 0.950 | 13.609 | 8.014 | 0.926 | 0.718 |
| 单球质量/kg Single bulb weight of curd | 0.496 ± 0.095 | 0.855 | 0.295 | 1.278 | 0.598 |
| 蕾粒大小/cm Bud grain size | 0.232 ± 0.045 | 0.362 | 0.128 | 0.268 | 0.512 |
| 性状 Trait | 球横径 Curd transverse diameter | 球纵径 Curd longitudinal diameter | 单球质量 Single bulb weight of curd | 茎横径 Bulb transverse diameter | 蕾粒大小 Bud grain size |
|---|---|---|---|---|---|
| 球横径Curd transverse diameter | 1.000 | ||||
| 球纵径Curd longitudinal diameter | 0.740** | 1.000 | |||
| 单球质量Single bulb weight of curd | 0.768** | 0.752** | 1.000 | ||
| 茎横径Bulb transverse diameter | 0.359** | 0.359** | 0.716** | 1.000 | |
| 蕾粒大小Bud grain size | -0.167 | -0.096 | -0.210* | -0.033 | 1.000 |
表3 F2群体各性状相关性分析
Table 3 Correlation analysis of various traits in F2 population
| 性状 Trait | 球横径 Curd transverse diameter | 球纵径 Curd longitudinal diameter | 单球质量 Single bulb weight of curd | 茎横径 Bulb transverse diameter | 蕾粒大小 Bud grain size |
|---|---|---|---|---|---|
| 球横径Curd transverse diameter | 1.000 | ||||
| 球纵径Curd longitudinal diameter | 0.740** | 1.000 | |||
| 单球质量Single bulb weight of curd | 0.768** | 0.752** | 1.000 | ||
| 茎横径Bulb transverse diameter | 0.359** | 0.359** | 0.716** | 1.000 | |
| 蕾粒大小Bud grain size | -0.167 | -0.096 | -0.210* | -0.033 | 1.000 |
| 材料 Material | 测序数据量/ Gb Sequence data | GC含量/% GC content | 平均Q20值/% Average Q20 | 比对率/% Mapped ratio | 平均测序深度/× Average depth | 基因覆盖率 ≥ 4× /% Gene coverage |
|---|---|---|---|---|---|---|
| B20101(♀) | 61.9 | 36.07 | 95.72 | 98.27 | 11.62 | 80.45 |
| B736(♂) | 62.4 | 36.78 | 95.48 | 98.39 | 11.98 | 82.12 |
| F2群体F2 population | 264.7 | 39.67 | 96.75 | 98.48 | 2.09 | 6.62 |
表4 过滤后的测序数据量、数据质量及比对至参考基因组的基本统计量
Table 4 The filtered sequencing data volume,data quality,and basic alignment statistics to the reference genome
| 材料 Material | 测序数据量/ Gb Sequence data | GC含量/% GC content | 平均Q20值/% Average Q20 | 比对率/% Mapped ratio | 平均测序深度/× Average depth | 基因覆盖率 ≥ 4× /% Gene coverage |
|---|---|---|---|---|---|---|
| B20101(♀) | 61.9 | 36.07 | 95.72 | 98.27 | 11.62 | 80.45 |
| B736(♂) | 62.4 | 36.78 | 95.48 | 98.39 | 11.98 | 82.12 |
| F2群体F2 population | 264.7 | 39.67 | 96.75 | 98.48 | 2.09 | 6.62 |
| 连锁群编号 Chain group number | SNP标记数 Number of SNP markers | Bin标记数量 Bin tag quantity | 遗传图谱的长度/cM Length of genetic map | 标记间平均图谱长度/cM Average map length between markers | 标记间最长图谱距离/cM The longest map distance between markers |
|---|---|---|---|---|---|
| LG1 | 247 | 77 | 66.55 | 0.86 | 3.35 |
| LG2 | 765 | 117 | 92.93 | 0.79 | 6.46 |
| LG3 | 1 238 | 192 | 126.23 | 0.66 | 8.49 |
| LG4 | 930 | 128 | 83.55 | 0.65 | 2.22 |
| LG5 | 563 | 83 | 71.65 | 0.86 | 6.83 |
| LG6 | 630 | 95 | 59.60 | 0.63 | 2.58 |
| LG7 | 298 | 73 | 107.26 | 1.47 | 30.90 |
| LG8 | 400 | 88 | 66.49 | 0.76 | 4.50 |
| LG9 | 1 258 | 132 | 114.52 | 0.87 | 7.69 |
| 平均Average | 703.2 | 109.44 | 87.64 | 0.84 | 8.11 |
| 合计Total | 6 329 | 985 | 788.78 | - | - |
表5 青花菜遗传图谱信息统计
Table 5 Statistical analysis of genetic map information of broccoli
| 连锁群编号 Chain group number | SNP标记数 Number of SNP markers | Bin标记数量 Bin tag quantity | 遗传图谱的长度/cM Length of genetic map | 标记间平均图谱长度/cM Average map length between markers | 标记间最长图谱距离/cM The longest map distance between markers |
|---|---|---|---|---|---|
| LG1 | 247 | 77 | 66.55 | 0.86 | 3.35 |
| LG2 | 765 | 117 | 92.93 | 0.79 | 6.46 |
| LG3 | 1 238 | 192 | 126.23 | 0.66 | 8.49 |
| LG4 | 930 | 128 | 83.55 | 0.65 | 2.22 |
| LG5 | 563 | 83 | 71.65 | 0.86 | 6.83 |
| LG6 | 630 | 95 | 59.60 | 0.63 | 2.58 |
| LG7 | 298 | 73 | 107.26 | 1.47 | 30.90 |
| LG8 | 400 | 88 | 66.49 | 0.76 | 4.50 |
| LG9 | 1 258 | 132 | 114.52 | 0.87 | 7.69 |
| 平均Average | 703.2 | 109.44 | 87.64 | 0.84 | 8.11 |
| 合计Total | 6 329 | 985 | 788.78 | - | - |
| 性状 Trait | 染色体 Chromosome | 标记位置 Marker location | 两侧标记 Flanking markers | 标记区间/cM Mark interval | LOD值 LOD score | PVE/% | Add |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 茎横径 Stem diameter | 3 | 352 | mk_59329733 ~ mk_61983136 | 345.5 ~ 352.5 | 3.8040 | 10.6135 | -0.18 |
| 4 | 191 | mk_44020554 ~ mk_44308972 | 189.5 ~ 199.5 | 2.6697 | 6.7029 | 0.17 | |
| 6 | 69 | mk_26545858 ~ mk_26599781 | 67.5 ~ 69.5 | 3.2893 | 9.1783 | -0.07 | |
| 球横径 Curd diameter | 3 | 36 | mk_5133507 ~ mk_5133762 | 30.5 ~ 42.5 | 2.8679 | 7.1147 | -0.37 |
| 3 | 276 | mk_51199178 ~ mk_51261577 | 275.5 ~ 277.5 | 3.4473 | 9.7267 | 0.04 | |
| 5 | 51 | mk_4074690 ~ mk_4153019 | 49.5 ~ 51.5 | 2.6245 | 7.1233 | -0.11 | |
| 球纵径Curd height | 2 | 9 | mk_879251 ~ mk_1150731 | 8.5 ~ 10.5 | 2.6825 | 8.6049 | 0.04 |
| 单球质量 Single curd weight | 2 | 28 | mk_2674478 ~ mk_3346265 | 23.5 ~ 29.5 | 3.7562 | 8.4158 | 0 |
| 3 | 188 | mk_22663199 ~ mk_23470854 | 184.5 ~ 189.5 | 3.5189 | 8.2725 | -0.01 | |
| 6 | 70 | mk_26599781 ~ mk_26607362 | 68.5 ~ 72.5 | 3.8045 | 7.9787 | -0.03 | |
| 8 | 21 | mk_23131455 ~ mk_23573175 | 19.5 ~ 24.5 | 3.1646 | 6.5766 | 0.03 | |
| 蕾粒大小 Flower bud size | 2 | 52 | mk_3843139 ~ mk_3943248 | 46.5 ~ 56.5 | 2.9333 | 4.7347 | 0.19 |
| 3 | 3 | mk_1051774 ~ mk_2492315 | 0 ~ 10.5 | 2.7691 | 4.8525 | 0.30 | |
| 3 | 201 | mk_24187897 ~ mk_25434737 | 198.5 ~ 204.5 | 2.8913 | 4.5689 | -0.22 | |
| 3 | 228 | mk_33679504 ~ mk_34006830 | 225.5 ~ 230.5 | 3.0358 | 4.7702 | -0.24 | |
| 4 | 266 | mk_50028229 ~ mk_50093062 | 263.5 ~ 268.5 | 2.7718 | 4.9079 | -0.29 | |
| 5 | 206 | mk_38951768 ~ mk_42411411 | 202.5 ~ 208.5 | 5.7033 | 10.3851 | 0.35 | |
| 6 | 23 | mk_18639516 ~ mk_18698493 | 20.5 ~ 23.5 | 10.6897 | 21.0997 | 0.64 | |
| 7 | 76 | mk_39797891 ~ mk_44097312 | 66.5 ~ 86.5 | 3.1648 | 6.7780 | 0.36 |
表6 青花菜花球相关农艺性状QTL定位分析
Table 6 QTL mapping analysis of agronomic traits related to cauliflower balls in broccoli
| 性状 Trait | 染色体 Chromosome | 标记位置 Marker location | 两侧标记 Flanking markers | 标记区间/cM Mark interval | LOD值 LOD score | PVE/% | Add |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 茎横径 Stem diameter | 3 | 352 | mk_59329733 ~ mk_61983136 | 345.5 ~ 352.5 | 3.8040 | 10.6135 | -0.18 |
| 4 | 191 | mk_44020554 ~ mk_44308972 | 189.5 ~ 199.5 | 2.6697 | 6.7029 | 0.17 | |
| 6 | 69 | mk_26545858 ~ mk_26599781 | 67.5 ~ 69.5 | 3.2893 | 9.1783 | -0.07 | |
| 球横径 Curd diameter | 3 | 36 | mk_5133507 ~ mk_5133762 | 30.5 ~ 42.5 | 2.8679 | 7.1147 | -0.37 |
| 3 | 276 | mk_51199178 ~ mk_51261577 | 275.5 ~ 277.5 | 3.4473 | 9.7267 | 0.04 | |
| 5 | 51 | mk_4074690 ~ mk_4153019 | 49.5 ~ 51.5 | 2.6245 | 7.1233 | -0.11 | |
| 球纵径Curd height | 2 | 9 | mk_879251 ~ mk_1150731 | 8.5 ~ 10.5 | 2.6825 | 8.6049 | 0.04 |
| 单球质量 Single curd weight | 2 | 28 | mk_2674478 ~ mk_3346265 | 23.5 ~ 29.5 | 3.7562 | 8.4158 | 0 |
| 3 | 188 | mk_22663199 ~ mk_23470854 | 184.5 ~ 189.5 | 3.5189 | 8.2725 | -0.01 | |
| 6 | 70 | mk_26599781 ~ mk_26607362 | 68.5 ~ 72.5 | 3.8045 | 7.9787 | -0.03 | |
| 8 | 21 | mk_23131455 ~ mk_23573175 | 19.5 ~ 24.5 | 3.1646 | 6.5766 | 0.03 | |
| 蕾粒大小 Flower bud size | 2 | 52 | mk_3843139 ~ mk_3943248 | 46.5 ~ 56.5 | 2.9333 | 4.7347 | 0.19 |
| 3 | 3 | mk_1051774 ~ mk_2492315 | 0 ~ 10.5 | 2.7691 | 4.8525 | 0.30 | |
| 3 | 201 | mk_24187897 ~ mk_25434737 | 198.5 ~ 204.5 | 2.8913 | 4.5689 | -0.22 | |
| 3 | 228 | mk_33679504 ~ mk_34006830 | 225.5 ~ 230.5 | 3.0358 | 4.7702 | -0.24 | |
| 4 | 266 | mk_50028229 ~ mk_50093062 | 263.5 ~ 268.5 | 2.7718 | 4.9079 | -0.29 | |
| 5 | 206 | mk_38951768 ~ mk_42411411 | 202.5 ~ 208.5 | 5.7033 | 10.3851 | 0.35 | |
| 6 | 23 | mk_18639516 ~ mk_18698493 | 20.5 ~ 23.5 | 10.6897 | 21.0997 | 0.64 | |
| 7 | 76 | mk_39797891 ~ mk_44097312 | 66.5 ~ 86.5 | 3.1648 | 6.7780 | 0.36 |
| 染色体Chromosome | 基因Gene | 功能Function |
|---|---|---|
| 6 | Bo6g067260 | 小核RNA激活复合物(SNAPc),亚基SNAP43蛋白(AT3G53270),mRNA Small nuclear RNA activating complex(SNAPc),subunit SNAP43 protein(AT3G53270),mRNA |
| 6 | Bo6g067270 | 功能未知Unknown function |
| 6 | Bo6g067280 | β-半乳糖苷酶15(BGAL15)β-galactosidase 15(BGAL15) |
| 6 | Bo6g067290 | 细胞色素p450 71b5(CYP71B5)Cytochrome p450 71b5(CYP71B5) |
表7 候选基因功能
Table 7 The function of candidate genes
| 染色体Chromosome | 基因Gene | 功能Function |
|---|---|---|
| 6 | Bo6g067260 | 小核RNA激活复合物(SNAPc),亚基SNAP43蛋白(AT3G53270),mRNA Small nuclear RNA activating complex(SNAPc),subunit SNAP43 protein(AT3G53270),mRNA |
| 6 | Bo6g067270 | 功能未知Unknown function |
| 6 | Bo6g067280 | β-半乳糖苷酶15(BGAL15)β-galactosidase 15(BGAL15) |
| 6 | Bo6g067290 | 细胞色素p450 71b5(CYP71B5)Cytochrome p450 71b5(CYP71B5) |
| 基因Gene | 亲本编号Parent number | 花蕾性状Flower bud characteristics | 相对表达量Relative expression level |
|---|---|---|---|
| Bo6g067260 | B20101(♀) | 大Large | 3.485 ± 0.470 aA |
| B736(♂) | 小Small | 1.020 ± 0.236 bB | |
| Bo6g067270 | B20101(♀) | 大Large | 0.788 ± 0.153 aA |
| B736(♂) | 小Small | 0.273 ± 0.114 bB | |
| Bo6g067280 | B20101(♀) | 大Large | 0.968 ± 0.219 bB |
| B736(♂) | 小Small | 3.028 ± 0.573 aA | |
| Bo6g067290 | B20101(♀) | 大Large | 1.097 ± 0.249 aA |
| B736(♂) | 小Small | 0.760 ± 0.105 bA |
表8 青花菜双亲候选基因相对表达量
Table 8 Relative expression levels of candidate genes from both parents of broccoli
| 基因Gene | 亲本编号Parent number | 花蕾性状Flower bud characteristics | 相对表达量Relative expression level |
|---|---|---|---|
| Bo6g067260 | B20101(♀) | 大Large | 3.485 ± 0.470 aA |
| B736(♂) | 小Small | 1.020 ± 0.236 bB | |
| Bo6g067270 | B20101(♀) | 大Large | 0.788 ± 0.153 aA |
| B736(♂) | 小Small | 0.273 ± 0.114 bB | |
| Bo6g067280 | B20101(♀) | 大Large | 0.968 ± 0.219 bB |
| B736(♂) | 小Small | 3.028 ± 0.573 aA | |
| Bo6g067290 | B20101(♀) | 大Large | 1.097 ± 0.249 aA |
| B736(♂) | 小Small | 0.760 ± 0.105 bA |
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