园艺学报 ›› 2026, Vol. 53 ›› Issue (3): 671-682.doi: 10.16420/j.issn.0513-353x.2025-0118
陈曦1,*, 温雪1,*, 张雅楠1, 王勇2, 李玉玲2, 孙峰2, 赵艳卓3, 牛早柱3, 徐炎1,**(
), 刘国甜1,**(
)
收稿日期:2025-03-18
修回日期:2025-11-19
出版日期:2026-03-25
发布日期:2026-03-20
通讯作者:
作者简介:* 共同第一作者
基金资助:
CHEN Xi1, WEN Xue1, ZHANG Yanan1, WANG Yong2, LI Yuling2, SUN Feng2, ZHAO Yanzhuo3, NIU Zaozhu3, XU Yan1,**(
), LIU Guotian1,**(
)
Received:2025-03-18
Revised:2025-11-19
Published:2026-03-25
Online:2026-03-20
摘要: 通过选配11个葡萄杂交组合,探究不同亲本基因型、胚发育培养基中不同玉米素(zeatin,ZT)浓度和不同类型畸形苗的转化对多倍体葡萄胚挽救效率的影响。结果表明:在胚珠发育阶段,添加0.5 mg · L-1 ZT时,杂交组合红宝石无核 × 蜜光的胚发育率(58.89%)和成苗率(22.22%)最高;胚萌发试验中,9个杂交组合的畸形苗发生比例(40.04% ~ 80.04%)均显著高于正常苗,其中子叶白化和多子叶畸形苗类型占比最高,分别为25.29%和24.13%;对不同畸形苗转化培养后,单子叶和多子叶畸形苗转化效率最显著,分别为52.79%和50.13%,子叶筒状畸形苗则不能转化为正常苗,最终11个杂交组合共获得489株杂种植株;筛选出‘红宝石无核’‘火州翠玉’‘底莱特’适宜作母本材料,‘蜜光’和‘大粒玫瑰香’适宜作父本材料。表明通过优化胚挽救技术和畸形苗转化策略,可有效提高三倍体葡萄胚挽救效率和成苗率。
陈曦, 温雪, 张雅楠, 王勇, 李玉玲, 孙峰, 赵艳卓, 牛早柱, 徐炎, 刘国甜. 多倍体葡萄胚挽救育种效率关键因素探究[J]. 园艺学报, 2026, 53(3): 671-682.
CHEN Xi, WEN Xue, ZHANG Yanan, WANG Yong, LI Yuling, SUN Feng, ZHAO Yanzhuo, NIU Zaozhu, XU Yan, LIU Guotian. Investigation of the Key Factors Influencing the Embryo Rescue Breeding Efficiency of Polyploid Grapes[J]. Acta Horticulturae Sinica, 2026, 53(3): 671-682.
| 杂交组合 Cross-combinations | 母本特性 Female characteristics | 父本特性 Male characteristics |
|---|---|---|
| 火州黑玉 × 沈农香丰 Huozhou Heiyu × Shennong Xiangfeng | 无核,二倍体 Seedless,diploid | 有核,玫瑰香味,四倍体 Seeded,rose-scented,tetraploid |
| 火州黑玉 × 大粒玫瑰香 Huozhou Heiyu × Dali Meiguixiang | 无核,二倍体 Seedless,diploid | 少核,玫瑰香味,四倍体 Few-seeded,cented,tetraploid |
| 底莱特 × 蜜光 Delight × Miguang | 无核,二倍体 Seedless,diploid | 有核,玫瑰香味,四倍体 Seeded,rose-scented,tetraploid |
| 底莱特 × 大粒玫瑰香 Delight × Dali Meiguixiang | 无核,二倍体 Seedless,diploid | 少核,玫瑰香味,四倍体 Few-seeded,rose-scented,tetraploid |
| 红宝石 × 大粒玫瑰香 Ruby Seedless × Dali Meiguixiang | 无核,二倍体 Seedless,diploid | 少核,玫瑰香味,四倍体 Few-seeded,rose-scented,tetraploid |
| 红宝石 × 蜜光 Ruby Seedless × Miguang | 无核,二倍体 Seedless,diploid | 有核,玫瑰香味,四倍体 Seeded,rose-scented,tetraploid |
| 火焰无核 × 蜜光 Flame Seedless × Miguang | 无核,二倍体 Seedless,diploid | 有核,玫瑰香味,四倍体 Seeded,rose-scented,tetraploid |
| 火州翠玉 × 大粒玫瑰香 Huozhou Cuiyu × Dali Meiguixiang | 无核,玫瑰香味,二倍体 Seedless,rose-scented,diploid | 有核,玫瑰香味,四倍体 Seeded,rose-scented,tetraploid |
| 蜜光 × 底莱特 Miguang × Delight | 有核,玫瑰香味,四倍体 Seeded,rose-scented,tetraploid | 无核,二倍体 Seedless,diploid |
| 蜜光 × 丽红宝 Miguang × Lihongbao | 有核,玫瑰香味,四倍体 Seeded,rose-scented,tetraploid | 无核,玫瑰香味,二倍体 Seedless,rose-scented,diploid |
| 蜜光 × 莫丽莎 Miguang × Melissa Seedless | 有核,玫瑰香味,四倍体 Seeded,rose-scented,tetraploid | 无核,玫瑰香味,二倍体 Seedless,rose-scented,diploid |
表1 杂交组合父、母本特性
Table 1 The characteristics of male and female parents
| 杂交组合 Cross-combinations | 母本特性 Female characteristics | 父本特性 Male characteristics |
|---|---|---|
| 火州黑玉 × 沈农香丰 Huozhou Heiyu × Shennong Xiangfeng | 无核,二倍体 Seedless,diploid | 有核,玫瑰香味,四倍体 Seeded,rose-scented,tetraploid |
| 火州黑玉 × 大粒玫瑰香 Huozhou Heiyu × Dali Meiguixiang | 无核,二倍体 Seedless,diploid | 少核,玫瑰香味,四倍体 Few-seeded,cented,tetraploid |
| 底莱特 × 蜜光 Delight × Miguang | 无核,二倍体 Seedless,diploid | 有核,玫瑰香味,四倍体 Seeded,rose-scented,tetraploid |
| 底莱特 × 大粒玫瑰香 Delight × Dali Meiguixiang | 无核,二倍体 Seedless,diploid | 少核,玫瑰香味,四倍体 Few-seeded,rose-scented,tetraploid |
| 红宝石 × 大粒玫瑰香 Ruby Seedless × Dali Meiguixiang | 无核,二倍体 Seedless,diploid | 少核,玫瑰香味,四倍体 Few-seeded,rose-scented,tetraploid |
| 红宝石 × 蜜光 Ruby Seedless × Miguang | 无核,二倍体 Seedless,diploid | 有核,玫瑰香味,四倍体 Seeded,rose-scented,tetraploid |
| 火焰无核 × 蜜光 Flame Seedless × Miguang | 无核,二倍体 Seedless,diploid | 有核,玫瑰香味,四倍体 Seeded,rose-scented,tetraploid |
| 火州翠玉 × 大粒玫瑰香 Huozhou Cuiyu × Dali Meiguixiang | 无核,玫瑰香味,二倍体 Seedless,rose-scented,diploid | 有核,玫瑰香味,四倍体 Seeded,rose-scented,tetraploid |
| 蜜光 × 底莱特 Miguang × Delight | 有核,玫瑰香味,四倍体 Seeded,rose-scented,tetraploid | 无核,二倍体 Seedless,diploid |
| 蜜光 × 丽红宝 Miguang × Lihongbao | 有核,玫瑰香味,四倍体 Seeded,rose-scented,tetraploid | 无核,玫瑰香味,二倍体 Seedless,rose-scented,diploid |
| 蜜光 × 莫丽莎 Miguang × Melissa Seedless | 有核,玫瑰香味,四倍体 Seeded,rose-scented,tetraploid | 无核,玫瑰香味,二倍体 Seedless,rose-scented,diploid |
图1 多倍体葡萄胚挽救育种程序 A:花粉采集;B:去雄;C:授粉;D:套袋;E:杂交幼果;F:胚珠发育培养;G:剥胚;H:胚萌发培养;I、J:胚发育成苗
Fig. 1 Breeding procedure for polyploid grape embryo rescue A:Pollen collection;B:Emasculation;C:Pollination;D:Bagging;E:Sampling of hybrid young fruits;F:Ovule development culture;G:Embryo dissection;H:Embryo germination culture;I,J:Embryo development into seedlings
图2 不同ZT浓度对多倍体杂交组合胚挽救效率的影响 基本培养基:ER(改良)+ 0.5 g · L-1水解酪蛋白 + 0.1 g · L-1肌醇 + 7 g · L-1琼脂 + 60 g · L-1蔗糖 + 3 g · L-1活性炭;对照、C1、C2、C3为分别添加ZT(0、0.5、1.0、1.5 mg · L-1)+ 0.2 mg · L-1 IAA。 不同小写字母表示经Tukey法多重比较差异显著(P < 0.05)
Fig. 2 Effects of different ZT concentrations on the efficiency of embryo rescue in polyploid hybrid combinations Basic medium:ER(Modified) + 0.5 g · L-¹ casein hydrolysate + 0.1 g · L-¹ inositol + 7 g · L-¹ agar + 60 g · L-¹ sucrose + 3 g · L-¹ activated carbon;Control,C1,C2,and C3 were supplemented with ZT(0,0.5,1.0,1.5 mg · L-¹)+ 0.2 mg · L-¹ IAA,respectively. Lowercase letters indicate significant by Tukey’s method for multiple comparisons(P < 0.05)
| 杂交组合 Cross-combinations | 胚发育数 No. of embryos developed | 萌发胚占比/% Per. of germinated embryos | 未萌发胚占比/% Per. of non-germinated embryos | |
|---|---|---|---|---|
| 正常苗 Normal seedlings | 畸形苗 Abnormal seedlings | |||
| 火州黑玉 × 沈农香丰 Huozhou Heiyu × Shennong Xiangfeng | 78 | 17.95 ± 1.28 c | 44.87 ± 1.28 a | 37.18 ± 1.28 b |
| 火州黑玉 × 大粒玫瑰香 Huozhou Heiyu × Dali Meiguixiang | 151 | 33.11 ± 0.59 b | 40.39 ± 0.39 a | 26.48 ± 0.48 c |
| 底莱特 × 蜜光 Delight × Miguang | 41 | 19.41 ± 2.01 c | 43.96 ± 1.10 a | 36.63 ± 0.92 b |
| 底莱特 × 大粒玫瑰香Delight × Dali Meiguixiang | 75 | 29.33 ± 1.33 b | 46.67 ± 1.33 a | 24.00 ± 2.31 b |
| 红宝石 × 大粒玫瑰香 Ruby Seedless × Dali Meiguixiang | 203 | 37.42 ± 2.86 b | 49.73 ± 2.86 a | 12.80 ± 0.94 c |
| 红宝石 × 蜜光 Ruby Seedless × Miguang | 170 | 28.24 ± 1.03 b | 46.47 ± 0.51 a | 25.29 ± 0.53 b |
| 火焰无核 × 蜜光 Flame Seedless × Miguang | 75 | 24.03 ± 0.56 c | 40.04 ± 0.93 a | 36.04 ± 0.83 b |
| 火州翠玉 × 大粒玫瑰香 Huozhou Cuiyu × Dali Meiguixiang | 205 | 31.71 ± 0.43 b | 55.61 ± 0.62 a | 12.69 ± 0.55 c |
| 蜜光 ×底莱特 Miguang × Delight | 40 | 19.96 ± 2.01 b | 80.04 ±2.34 a | 0 c |
| 蜜光 × 丽红宝 Miguang × Lihongbao | 9 | 22.22 ± 11.11 b | 77.78 ± 11.11 a | 0 c |
| 蜜光 × 莫丽莎 Miguang × Melissa Seedless | 9 | 22.22 ± 11.11 b | 77.78 ± 11.11 a | 0 c |
表2 11个多倍体杂交组合胚萌发结果比较
Table 2 Comparison of embryo germination results among eleven polyploid cross combinations
| 杂交组合 Cross-combinations | 胚发育数 No. of embryos developed | 萌发胚占比/% Per. of germinated embryos | 未萌发胚占比/% Per. of non-germinated embryos | |
|---|---|---|---|---|
| 正常苗 Normal seedlings | 畸形苗 Abnormal seedlings | |||
| 火州黑玉 × 沈农香丰 Huozhou Heiyu × Shennong Xiangfeng | 78 | 17.95 ± 1.28 c | 44.87 ± 1.28 a | 37.18 ± 1.28 b |
| 火州黑玉 × 大粒玫瑰香 Huozhou Heiyu × Dali Meiguixiang | 151 | 33.11 ± 0.59 b | 40.39 ± 0.39 a | 26.48 ± 0.48 c |
| 底莱特 × 蜜光 Delight × Miguang | 41 | 19.41 ± 2.01 c | 43.96 ± 1.10 a | 36.63 ± 0.92 b |
| 底莱特 × 大粒玫瑰香Delight × Dali Meiguixiang | 75 | 29.33 ± 1.33 b | 46.67 ± 1.33 a | 24.00 ± 2.31 b |
| 红宝石 × 大粒玫瑰香 Ruby Seedless × Dali Meiguixiang | 203 | 37.42 ± 2.86 b | 49.73 ± 2.86 a | 12.80 ± 0.94 c |
| 红宝石 × 蜜光 Ruby Seedless × Miguang | 170 | 28.24 ± 1.03 b | 46.47 ± 0.51 a | 25.29 ± 0.53 b |
| 火焰无核 × 蜜光 Flame Seedless × Miguang | 75 | 24.03 ± 0.56 c | 40.04 ± 0.93 a | 36.04 ± 0.83 b |
| 火州翠玉 × 大粒玫瑰香 Huozhou Cuiyu × Dali Meiguixiang | 205 | 31.71 ± 0.43 b | 55.61 ± 0.62 a | 12.69 ± 0.55 c |
| 蜜光 ×底莱特 Miguang × Delight | 40 | 19.96 ± 2.01 b | 80.04 ±2.34 a | 0 c |
| 蜜光 × 丽红宝 Miguang × Lihongbao | 9 | 22.22 ± 11.11 b | 77.78 ± 11.11 a | 0 c |
| 蜜光 × 莫丽莎 Miguang × Melissa Seedless | 9 | 22.22 ± 11.11 b | 77.78 ± 11.11 a | 0 c |
图3 多倍体胚挽救畸形苗分类 A:单子叶畸形苗;B:多子叶畸形苗;C:子叶白化畸形苗;D:有叶无根畸形苗;E:有根无叶畸形苗;F:子叶融合畸形苗;G:子叶筒状畸形苗
Fig. 3 Classification of abnormal seedlings from polyploid embryo rescue A:Monocotyledonous abnormal seedling;B:Polycotyledonous abnormal seedling;C:Albino cotyledon abnormal seedling;D:Leafy rootless abnormal seedling;E:Rooted leafless abnormal seedling;F:Fused cotyledon abnormal seedling;G:Tubular cotyledon abnormal seedling
| 畸形苗类型 Types of abnormal seedlings | 畸形苗 Abnormal seedlings | 转化正常苗数 Transformed normal seedlings | ||
|---|---|---|---|---|
| 数量No. | 占比/% Per. | 数量 No. | 占比/% Per. | |
| 单子叶畸形苗 Monocotyledonous abnormal seedling | 84 | 16.22 ± 0.36 c | 41 | 50.13 ± 3.10 a |
| 多子叶畸形苗 Polycotyledonous abnormal seedling | 125 | 24.13 ± 0.15 a | 66 | 52.79 ± 1.04 a |
| 子叶白化畸形苗 Cotyledon albinism abnormal seedling | 131 | 25.29 ± 0.14 a | 39 | 29.76 ± 1.13 b |
| 有叶无根畸形苗 Leaf without root abnormal seedling | 115 | 22.20 ± 0.18 b | 15 | 13.02 ± 1.40 c |
| 有根无叶畸形苗 Root without leaf abnormal seedling | 21 | 4.05 ± 0.33 e | 5 | 23.41 ± 3.53 b |
| 子叶融合畸形苗 Cotyledon fusion abnormal seedling | 39 | 7.53 ± 0.32 d | 9 | 23.17 ± 1.03 b |
| 子叶筒状畸形苗 Tubular cotyledon abnormal seedling | 3 | 0.58 ± 0.00 f | 0 | 0 d |
表3 不同类型畸形苗的胚挽救效率比较
Table 3 Comparison of embryo rescue efficiency among different types of abnormal seedlings
| 畸形苗类型 Types of abnormal seedlings | 畸形苗 Abnormal seedlings | 转化正常苗数 Transformed normal seedlings | ||
|---|---|---|---|---|
| 数量No. | 占比/% Per. | 数量 No. | 占比/% Per. | |
| 单子叶畸形苗 Monocotyledonous abnormal seedling | 84 | 16.22 ± 0.36 c | 41 | 50.13 ± 3.10 a |
| 多子叶畸形苗 Polycotyledonous abnormal seedling | 125 | 24.13 ± 0.15 a | 66 | 52.79 ± 1.04 a |
| 子叶白化畸形苗 Cotyledon albinism abnormal seedling | 131 | 25.29 ± 0.14 a | 39 | 29.76 ± 1.13 b |
| 有叶无根畸形苗 Leaf without root abnormal seedling | 115 | 22.20 ± 0.18 b | 15 | 13.02 ± 1.40 c |
| 有根无叶畸形苗 Root without leaf abnormal seedling | 21 | 4.05 ± 0.33 e | 5 | 23.41 ± 3.53 b |
| 子叶融合畸形苗 Cotyledon fusion abnormal seedling | 39 | 7.53 ± 0.32 d | 9 | 23.17 ± 1.03 b |
| 子叶筒状畸形苗 Tubular cotyledon abnormal seedling | 3 | 0.58 ± 0.00 f | 0 | 0 d |
图4 多倍体胚挽救畸形苗转化正常苗流程 A ~ D:分别为单子叶畸形苗、多子叶畸形苗、子叶白化畸形苗和子叶筒状畸形苗接种在转化培养基中培养;E ~ H:分别为单子叶畸形苗、多子叶畸形苗、子叶白化畸形苗和子叶筒状畸形苗长出真叶;I:培养30 d后,长成正常苗
Fig. 4 Process of converting abnormal seedlings from polyploid embryo rescue into normal seedlings A-D:Monocotyledonous abnormal seedling,polycotyledonous abnormal seedling,albino cotyledon abnormal seedling,and tubular cotyledon abnormal seedling were inoculated and cultured on the conversion medium. E-H:Monocotyledonous abnormal seedling,polycotyledonous abnormal seedling,albino cotyledon abnormal seedling,and tubular cotyledon abnormal seedling developed true leaves. I:After 30 days of culture,the seedlings grew into normal seedlings
| 杂交组合 Cross-combinations | 果粒数 No. of berries | 胚珠数 No. of ovules | 胚发育数 Per. of developed embryos | 胚发育率/% Per. of developed embryos | 成苗总数 Total number of established seedlings | 成苗率/% Per. of established seedlings |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 火州黑玉 × 沈农香丰 Huozhou Heiyu × Shennong Xiangfeng | 256 | 312 | 78 | 25.00 | 25 | 8.97 |
| 火州黑玉 × 大粒玫瑰香 Huozhou Heiyu × Dali Meiguixiang | 635 | 799 | 151 | 18.90 | 63 | 7.88 |
| 底莱特 × 蜜光 Delight × Miguang | 215 | 160 | 41 | 25.63 | 18 | 11.25 |
| 底莱特 × 大粒玫瑰香 Delight × Dali Meiguixiang | 315 | 231 | 75 | 32.47 | 34 | 14.72 |
| 红宝石 × 大粒玫瑰香 Ruby Seedless × Dali Meiguixiang | 408 | 640 | 203 | 31.72 | 107 | 16.72 |
| 红宝石 × 蜜光 Ruby Seedless × Miguang | 247 | 334 | 170 | 50.90 | 81 | 24.25 |
| 火焰无核 × 蜜光 Flame Seedless × Miguang | 245 | 372 | 75 | 20.16 | 24 | 6.45 |
| 火州翠玉 × 大粒玫瑰香 Huozhou Cuiyu × Dali Meiguixiang | 281 | 500 | 205 | 41.00 | 113 | 22.60 |
| 蜜光 × 底莱特 Miguang × Delight | 181 | 217 | 40 | 18.43 | 13 | 5.99 |
| 蜜光 × 丽红宝 Miguang × Lihongbao | 39 | 47 | 9 | 19.15 | 3 | 6.38 |
| 蜜光 × 莫丽莎 Miguang × Melissa Seedless | 70 | 45 | 9 | 20.00 | 5 | 11.11 |
| 合计Total | 2 892 | 3 657 | 1 056 | 29.09 | 489 | 13.37 |
表4 11个多倍体胚挽救杂交组合育种结果
Table 4 Breeding results of 11 polyploid embryo rescue cross combinations
| 杂交组合 Cross-combinations | 果粒数 No. of berries | 胚珠数 No. of ovules | 胚发育数 Per. of developed embryos | 胚发育率/% Per. of developed embryos | 成苗总数 Total number of established seedlings | 成苗率/% Per. of established seedlings |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 火州黑玉 × 沈农香丰 Huozhou Heiyu × Shennong Xiangfeng | 256 | 312 | 78 | 25.00 | 25 | 8.97 |
| 火州黑玉 × 大粒玫瑰香 Huozhou Heiyu × Dali Meiguixiang | 635 | 799 | 151 | 18.90 | 63 | 7.88 |
| 底莱特 × 蜜光 Delight × Miguang | 215 | 160 | 41 | 25.63 | 18 | 11.25 |
| 底莱特 × 大粒玫瑰香 Delight × Dali Meiguixiang | 315 | 231 | 75 | 32.47 | 34 | 14.72 |
| 红宝石 × 大粒玫瑰香 Ruby Seedless × Dali Meiguixiang | 408 | 640 | 203 | 31.72 | 107 | 16.72 |
| 红宝石 × 蜜光 Ruby Seedless × Miguang | 247 | 334 | 170 | 50.90 | 81 | 24.25 |
| 火焰无核 × 蜜光 Flame Seedless × Miguang | 245 | 372 | 75 | 20.16 | 24 | 6.45 |
| 火州翠玉 × 大粒玫瑰香 Huozhou Cuiyu × Dali Meiguixiang | 281 | 500 | 205 | 41.00 | 113 | 22.60 |
| 蜜光 × 底莱特 Miguang × Delight | 181 | 217 | 40 | 18.43 | 13 | 5.99 |
| 蜜光 × 丽红宝 Miguang × Lihongbao | 39 | 47 | 9 | 19.15 | 3 | 6.38 |
| 蜜光 × 莫丽莎 Miguang × Melissa Seedless | 70 | 45 | 9 | 20.00 | 5 | 11.11 |
| 合计Total | 2 892 | 3 657 | 1 056 | 29.09 | 489 | 13.37 |
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