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当期目录

    2018年, 第45卷, 第1期 上一期    下一期

    研究论文

    • 苹果bZIP转录因子基因MdAREB2功能的初步研究
    • 刘亚静,马齐军,路 静,郝玉金,由春香*
    • 园艺学报. 2018, 45(1): 1-10. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0195
    • 摘要 ( 466 ) HTML ( 1082 ) PDF (2212KB) ( 1082 )   
    • 对‘嘎拉’苹果中的1个bZIP转录因子基因MdAREB2(序列号:MDP0000248567)进行功能初步研究。蛋白进化树分析表明,苹果MdAREB2与拟南芥AtAREB2具有很高的同源性。利用PlantCare数据库进行启动子顺式作用元件的预测分析,MdAREB2启动子序列中存在脱落酸响应元件ABRE。实时定量PCR检测表明,MdAREB2明显受ABA诱导。拟南芥种子萌发阶段经过0.5和2 μmol · L-1 ABA处理后发现突变体abi5中过量表达MdAREB2能够恢复对ABA的敏感性。拟南芥幼苗生长阶段,经过20 μmol · L-1 ABA处理后发现,突变体abi5中过量表达MdAREB2能够部分恢复对ABA的敏感性。
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    • 棉隆熏蒸加短期轮作葱显著减轻苹果连作障碍
    • 徐少卓1,刘宇松1,夏明星2,王英平2,陈学森1,沈 向1,尹承苗1,*,毛志泉1,*
    • 园艺学报. 2018, 45(1): 11-20. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0176
    • 摘要 ( 249 ) HTML ( 824 ) PDF (895KB) ( 824 )   
    • 在盆栽条件下,以苹果砧木平邑甜茶幼苗为试材,研究棉隆熏蒸老龄苹果园土壤并轮作一季葱,对土壤微生物环境及平邑甜茶幼苗生长的影响,以期为防控苹果连作障碍提供新技术。2015年5月进行4种试验处理,分别为老龄苹果园土壤对照,老龄苹果园土壤轮作葱,棉隆熏蒸老龄苹果园土壤,棉隆熏蒸老龄苹果园土壤后轮作葱,2016年5月各处理土壤统一定植平邑甜茶幼苗。结果表明:与对照相比,棉隆熏蒸后轮作葱处理的土壤真菌数量减少了73%,层出镰孢菌的基因拷贝数减少67%,细菌数减少19%,细菌/真菌比值增加了213%。T-RFLP图谱的主成分分析(PCA)、聚类分析结果显示,棉隆熏蒸后轮作葱明显改变了土壤真菌群落结构,且比单纯棉隆熏蒸处理提高了土壤脲酶、蔗糖酶、中性磷酸酶、过氧化氢酶活性。棉隆熏蒸后轮作葱处理,平邑甜茶株高、茎粗、鲜质量和干质量分别为连作土对照的1.96倍、1.75倍、2.31倍和2.34倍,根长、根面积、根体积和根呼吸速率较连作土对照分别提高了155%、310%、294%和89%。可见,棉隆熏蒸后轮作葱处理,具有最高的细菌/真菌比值,并显著改变了土壤真菌群落结构,提高了土壤酶活性,促进了平邑甜茶幼苗的生长,防控连作障碍的效果优于单纯棉隆熏蒸,是减轻苹果连作障碍的有效措施。
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    • 根皮苷和串珠镰孢菌加重苹果连作土壤环境及其对平邑甜茶生长的抑制
    • 姜伟涛1,*,尹承苗1,2,*,段亚楠1,相 立1,王 玫1,陈学森1,沈 向1,张 民2,**,毛志泉1,**
    • 园艺学报. 2018, 45(1): 21-29. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0285
    • 摘要 ( 254 ) HTML ( 721 ) PDF (721KB) ( 721 )   
    • 以平邑甜茶幼苗(Malus hupehensis Rehd.)为试材,在盆栽条件下研究了串珠镰孢菌和根皮苷对幼苗生长及连作土壤微生物的影响,为阐明连作障碍的发生机理提供理论依据。结果表明:8月份串珠镰孢菌、根皮苷、串珠镰孢菌 + 根皮苷处理均不同程度降低了连作条件下‘平邑甜茶’幼苗的生物量,其中串珠镰孢菌 + 根皮苷处理的株高、地径、鲜质量、干质量降低最显著,分别为连作土对照的70.6%、77.4%、52.3%和43.7%;9月份各处理的生长量趋势与8月份一致。在8月和9月,不同处理对幼苗根系呼吸速率的抑制作用表现为:串珠镰孢菌 + 根皮苷 > 串珠镰孢菌 > 根皮苷 > 连作土对照。3个处理均不同程度地抑制了连作土壤中细菌的生长,促进了真菌的生长,改变了土壤真菌的群落结构。3个处理均不同程度地降低了连作土壤中脲酶、中性磷酸酶、蔗糖酶和过氧化氢酶的活性;在8月,根皮苷、串珠镰孢菌、串珠镰孢菌 + 根皮苷处理后对土壤脲酶活性的抑制作用较显著,分别比对照降低14.8%、29.1%和53.4%。综上,串珠镰孢菌和根皮苷单独或组合处理均显著抑制了‘平邑甜茶’幼苗的生长,其中串珠镰孢菌 + 根皮苷处理最为显著,说明根皮苷和串珠镰孢菌共同作用加重了苹果连作障碍现象。
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    • NaCl胁迫对耐盐性不同葡萄株系叶片活性氧代谢及清除系统的影响
    • 付晴晴,谭雅中,翟 衡,杜远鹏*
    • 园艺学报. 2018, 45(1): 30-40. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0388
    • 摘要 ( 400 ) HTML ( 1053 ) PDF (4242KB) ( 1053 )   
    • 探究耐盐性不同的葡萄株系叶片活性氧产生及其清除系统对盐胁迫的响应,以期揭示耐盐性较强的葡萄种间杂交F1代株系的耐盐机制。采用组培苗营养液培养方式,以山葡萄‘左山一’与砧木SO4杂交初选的耐盐性较强的F1代株系(A15、A17)为试材,以1103P为参照品种,进行100 mmol · L-1 NaCl处理,测定各株系叶片的 产生速率、H2O2含量、相对电导率、MDA含量和叶绿素含量以及抗氧化酶活性和抗氧化物质含量等指标,并观察叶绿体超微结构。结果表明,100 mmol · L-1 NaCl胁迫下,耐盐性较强的A15和A17能够维持较高的SOD、CAT、POD等抗氧化酶的活性,保持AsA-GSH循环系统中较高的AsA和GSH含量以及APX、GR等酶的活性,ROS、MDA产生较少,相对电导率升高幅度较小,叶绿体结构较完整,维持较高的叶绿体色素含量;而耐盐性较弱的1103P体内产生大量的ROS和MDA,叶绿体膜结构的完整性遭到破坏,叶绿素含量下降幅度大。
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    • 森林草莓醇酰基转移酶基因FvAATW2功能研究
    • 董 静,王桂霞,钟传飞,常琳琳,孙 健,张宏力,孙 瑞,石 琨,隗永青,张运涛*
    • 园艺学报. 2018, 45(1): 41-50. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0085
    • 摘要 ( 262 ) HTML ( 782 ) PDF (1095KB) ( 782 )   
    • 在从森林草莓(Fragaria vesca L.)成熟果实中克隆到醇酰基转移酶基因(FvAATW2)的基础上,构建由CaMV35S启动子驱动的植物正义表达载体pBI121-FvAATW2,在烟草(Nicotiana tabacum L.)和草莓(Fragaria × ananassa Duch.)‘Camarosa’品种中过量表达FvAATW2,以研究其功能。采用农杆菌介导的叶盘法转化烟草和草莓;利用PCR和Southern blot筛选出转基因株系;通过实时定量PCR和测定AAT酶活性来检测转基因植株中外源基因的表达;利用SPME/GC–MS方法检测烟草叶片和草莓果实中的挥发性成分。对转基因烟草外源基因表达和早期叶片挥发性成分的检测结果表明,构建的FvAATW2表达载体功能正常,转基因株系能够在生长早期合成酯类物质;通过检测转基因草莓成熟果实的酯类成分发现,与野生型对照相比,转基因草莓果实中酯类占挥发物的总比例以及乙酸辛酯、己酸乙酯、己酸辛酯、辛酸乙酯等挥发酯的比例显著提高,而丁酸甲酯的含量显著降低,辛酸乙酯的含量显著增加,说明外源FvAATW2在草莓中能够正常表达并影响果实酯类合成,从而通过改变挥发性酯类构成使果实香气变浓。
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    • 荔枝能荷水平及能量相关基因表达与采后褐变关系的研究
    • 高兆银1,胡美姣1,赵 超2,张正科3,李 敏1,李焕苓1,王 果1,孙进华1,文 婕2,王家保1,*
    • 园艺学报. 2018, 45(1): 51-60. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2016-0930
    • 摘要 ( 251 ) HTML ( 777 ) PDF (890KB) ( 777 )   
    • 为了揭示荔枝果实采后能量调控规律及其与衰老的关系,以‘南岛无核’荔枝果实为材料,研究自然能荷水平(清水浸泡30 min,25 ℃贮藏,对照);低能荷水平(2,4–二硝基苯酚,即DNP浸泡30 min,25 ℃贮藏);较高能荷水平(5 ℃低温贮藏)等3种能荷水平状态下果皮衰老变化与能量、能量相关(生成、转运、耗散)基因表达的关系。结果表明:与对照相比,DNP处理(低能荷水平)明显促进了荔枝果实衰老,5 ℃低温贮藏(高能荷水平)果实衰老缓慢。DNP处理,LcAOX1在6 h表达量上调,果实在24 h开始大量褐变,LcUCP1的表达受到明显抑制,LcSnRK2的表达水平上调时间提前,表达水平提高。在荔枝果实贮藏后期,对照和DNP处理,果实能荷水平较低,果实衰老严重时,LcAAC1、LcAOX1、LcUCP1表达水平也出现下降。5 ℃低温贮藏,LcAAC1、LcAOX1、LcUCP1和LcSnRK2的表达量均保持在较低水平。荔枝果实采后能荷水平下降是导致果实快速衰老的重要因素之一,LcSnRK2和LcAAC1是荔枝果皮能量变化的敏感基因,对能量匮乏反应快,能荷水平下降可诱导LcSnRK2和LcAAC1表达上调。LcAOX1和LcUCP1表达量上调与荔枝果实衰老同步,它们的表达水平提高可以作为荔枝果实采后开始走向衰老的参考标志。
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    • 芥蓝和结球甘蓝分别与甘蓝型油菜杂交的后代结实性及Rfo传递效率比较
    • 于海龙*,李志远*,杨丽梅,刘玉梅,庄 木,吕红豪,李占省,方智远**,张扬勇**
    • 园艺学报. 2018, 45(1): 61-70. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0557
    • 摘要 ( 584 ) HTML ( 927 ) PDF (4432KB) ( 927 )   
    • 为明确甘蓝与甘蓝型油菜种间杂交的生殖隔离程度是否与甘蓝的变种类型有关,以2份Ogura CMS芥蓝和4份Ogura CMS结球甘蓝为母本,分别与2份含有Ogura CMS育性恢复基因Rfo的甘蓝型油菜杂交,获得的种间杂种加倍后,再分别与母本芥蓝和结球甘蓝回交,调查F1、BC1两个世代材料的结实性和Rfo基因的传递效率。结果表明,芥蓝与甘蓝型油菜种间杂交F1代、BC1代的亲和指数都显著高于结球甘蓝(P < 0.05),是结球甘蓝的2倍以上,且在芥蓝材料中Rfo基因的传递效率高于结球甘蓝。进一步比较BC1回交后代Rfo阳性单株的育性、遗传背景回复率,芥蓝的育性大多显著好于结球甘蓝(P < 0.05),26株BC1单株遗传背景回复率在0.50 ~ 0.84之间;而结球甘蓝两个BC1单株(15Y1和15Y4)遗传背景回复率分别为0.53和0.59。上述结果说明,芥蓝较结球甘蓝更易与甘蓝型油菜杂交获得后代,且异源目的片段的传递效率更高,因此芥蓝可作为结球甘蓝与甘蓝型油菜杂交的桥梁材料,加速甘蓝型油菜中优异性状的转育进程。
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    • 结球甘蓝自花和异花授粉诱导的柱头转录组分析
    • 蒲 敏1,廉小平2,*,罗绍兰1,张贺翠1,王玉奎1,白晓璟1,曾 静1,高启国2,任雪松2,朱利泉1,**
    • 园艺学报. 2018, 45(1): 71-84. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0480
    • 摘要 ( 386 ) HTML ( 1567 ) PDF (803KB) ( 1567 )   
    • 分别以自花授粉30 min、异花授粉30 min和未授粉处理的甘蓝柱头进行Illumina HiSeq2000高通量转录组测序,分析自交不亲和性甘蓝自花授粉、异花授粉柱头与未授粉柱头中基因表达的差异。转录组测序共获得1.6 × 108对原始序列读取片段,总碱基数为2.38 × 1010 bp,与未授粉对照相比,自花、异花授粉后差异表达的基因分别有2 900个和2 328个,共有的差异表达基因1 904个。在差异表达基因背景和全部基因背景下,自花授粉较大比例的差异基因是细胞杀伤、胞外基质部分和核酸结合转录因子活性;异花授粉较大比例的差异基因是信号传递、胞外区域部分、结构分子活性和营养库活性。GO功能的显著性富集分析表明,自花授粉处理后特有的40个极显著的富集条目主要涉及糖跨膜转运活性、微管结合和钙调素依赖性蛋白激酶活性等。异花授粉特有的53个极显著的富集条目主要涉及法尼酸O–甲基转移酶的活性、微管负向运动和生长素跨膜运输等。自花授粉处理后特异差异表达的996个基因主要涉及钙离子结合、细胞骨架相关、茉莉酸和水杨酸代谢等生物过程,异花授粉处理后特异差异表达的424个基因主要涉及物质跨膜转运及脂质代谢。
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    • 甘蓝自交不亲和性相关基因BoPLL的克隆、定位与表达分析
    • 罗绍兰1,蒲 敏1,曾 静1,施松梅2,廉小平2,王玉奎1,白晓璟1,张贺翠1,朱利泉1,*
    • 园艺学报. 2018, 45(1): 85-96. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0389
    • 摘要 ( 290 ) HTML ( 814 ) PDF (2239KB) ( 814 )   
    • 对高度自交不亲和甘蓝柱头进行自花授粉和异花授粉处理后,取柱头进行蛋白质表达谱的比较研究,获得一种受自花授粉诱导下调表达,异花授粉诱导上调表达的蛋白,命名为BoPLL。进一步分析转录组数据发现,BoPLL在自花授粉0 ~ 30 min上调表达,30 ~ 60 min下调表达,而在异花授粉0 ~ 60 min一直上调表达。克隆获得cDNA为1 212 bp,编码含403个氨基酸残基的蛋白质BoPLL。序列分析发现BoPLL含有高度保守的PASTA结构域和CMM-10结构域、中度保守的PbH1结构域、低度保守的HYDRO结构域,说明该蛋白是典型的PLL家族蛋白。染色体定位结果表明,该基因与自交不亲和性相关基因不连锁。进化分析表明,甘蓝BoPLL与拟南芥AtPLL亲缘关系最近,与苜蓿MtPLL亲缘关系较远。RT-PCR发现,BoPLL在甘蓝花粉和柱头中表达,且柱头中的表达量明显低于花粉,在叶片、花蕾、萼片和花瓣中均没有检测到表达信号。荧光定量PCR结果显示,BoPLL在自花授粉和异花授粉15 ~ 60 min的表达变化趋势与转录组分析结果基本一致。根据上述结果推测BoPLL可能是一种参与甘蓝自交不亲和反应过程的基因。
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    • 转Cry1Ac青花菜回交后代鉴定方法研究
    • 李占省,张黎黎,张小丽,舒金帅,苏彦宾,孙继峰,刘玉梅*,方智远,杨丽梅,庄 木,张扬勇,吕红豪
    • 园艺学报. 2018, 45(1): 97-108. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0617
    • 摘要 ( 301 ) HTML ( 692 ) PDF (1954KB) ( 692 )   
    • 转Bt基因青花菜在遗传分离后代中的鉴定方法,对于准确筛选阳性单株和抗虫材料具有重要影响。利用5份青花菜材料、1份阳性对照(转Cry1Ac基因纯合材料)和5份回交父本(阴性对照)为试验对象,在基因水平上对Cry1Ac进行普通PCR扩增,蛋白水平上采用Bt-Cry1Ab/1Ac转基因检测试纸条测定,表观上采用小菜蛾离体饲虫试验进行抗性鉴定,比较阐明了3种方法的鉴定效果和优缺点。结果表明,3种方法分别从5份青花菜回交材料的159个分离单株中检测到82、77和75份阳性株,经卡方显著性检验,各材料阳性单株与非阳性单株分离后代均符合孟德尔遗传规律。分析表明,小菜蛾离体饲虫试验对于鉴定转Cry1Ac后代抗虫效果准确可靠,但需要很好地控制实验条件;Bt-Cry1Ab/1Ac转基因检测试纸条灵敏度高,可快速观察到Bt毒蛋白的实际表达量,基本不受条件限制,但必须控制人为误差;普通PCR扩增能够鉴定阳性株,但不能反映实际抗虫效果,必须结合小菜蛾饲虫试验或Bt毒蛋白水平上的检测才能实现精准鉴定。
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    • 钟冠报春苣苔花发育进程中花色素苷含量的变化
    • 胡 彬1,2,丁德辉1,3,傅秀敏1,冯 超1,*,康 明1
    • 园艺学报. 2018, 45(1): 117-125. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0205
    • 摘要 ( 213 ) HTML ( 771 ) PDF (2203KB) ( 771 )   
    • 采用超高效液相色谱—四级杆飞行时间串联质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS)测定钟冠报春苣苔(Primulina swinglei)花发育进程中花色素苷在各花器官组织中的分布、含量及比例。共鉴定出17种花色素苷类物质,分别为矢车菊素、芍药花素、飞燕草素、矮牵牛素及锦葵素及其与葡萄糖、芸香糖、乙酰芸香糖等糖苷组合而成的苷元。研究发现,呈紫色的花瓣中蓝紫色的花色素(飞燕草素、矮牵牛素及锦葵素)比例达到64.0%;呈红色的花筒中红粉色的矢车菊素及芍药花素分别占36.7%和20.0%。开花前总花色素苷含量缓慢上升并趋于稳态,该过程中红粉色的花色素占据比例逐渐减小,而蓝紫色花色素所占比例渐趋增加,这可能与花瓣/花筒的比例渐趋增大有关。而花盛开之后,花色素苷含量急剧降低,可能与花色素苷的降解或稀释相关。
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    研究报告

    • 基于ITS序列的中国樱桃、欧洲甜樱桃和毛樱桃种内遗传多样性及种间关系分析
    • 王 浩?1,黄智林1,陈 涛2,张 静2,王 燕2,陈 清1,汤浩茹1,2,王小蓉1,2,*
    • 园艺学报. 2018, 45(1): 126-138. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0317
    • 摘要 ( 397 ) HTML ( 1010 ) PDF (1535KB) ( 1010 )   
    • 对中国樱桃[Cerasus pseudocerasus(Lindl.)G. Don](地方种质35份,野生资源35份),欧洲甜樱桃[C. avium(L.)Moench](18份)和毛樱桃[C. tomentosa(Thunb.)Wall.](7份)共95份材料的核糖体内转录间隔区(ITS,internal transcribed spacer)序列进行了测定和分析,以期从ITS的DNA序列变异角度揭示种内遗传多样性及种间遗传关系。结果表明:(1)96条ITS序列比对后长度为712 bp,G + C含量为58.1%,检测到71个变异位点(9.97%),共定义了37个单倍型;中国樱桃、欧洲甜樱桃和毛樱桃的单倍型多样性和核酸多样性分别为0.840和0.00466、0.928和0.00396、0.905和0.00564,中国樱桃中栽培种质遗传多样性明显低于其野生资源;(2)种间遗传关系显示,中国樱桃与欧洲甜樱桃之间的遗传距离较近(0.019),而与毛樱桃遗传距离较远(0.048);(3)邻接聚类和单倍型网络分析显示3个种分别聚为3个分支,种间具有较大的遗传分化。同时,选择3个种的代表单倍型进行其ITS序列的二级结构预测分析,3个种之间ITS1区、ITS2区的二级结构差异较大,最小自由能差异显著,进一步揭示了3个种间的遗传关系较远。综合分析认为,3个樱桃种内均具有较高的遗传多样性,种间具有较大的遗传分化,遗传关系较远,其中毛樱桃与中国樱桃和欧洲甜樱桃的遗传关系均较远。

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    • 平欧杂交榛转录组中SSR信息分析和引物筛选
    • 程云清,张丽娜,赵永斌,刘剑锋*
    • 园艺学报. 2018, 45(1): 139-148. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0281
    • 摘要 ( 254 ) HTML ( 751 ) PDF (690KB) ( 751 )   
    • 对平欧杂交榛的转录组数据进行了深入挖掘,以期开发其SSRs标记。在25 649条含SSR序列的Unigene中,共找到35 604条SSR序列;其中,单、二、三核苷酸重复为高频类型,其数量及所占百分比分别为:10 102(28.37%)、16 543(46.46%)、7 035(19.76%);在单核苷酸重复中,A/T重复最多(28.13%);二核苷酸重复中,AG/CT(35.79%)、AT/AT(7.47%)、AC/GT(3.17%)最为丰富;三、四、五、六核苷酸重复中,比例最高的重复序列分别为:AAG/CTT(7.24%)、AAAG/CTTT(0.33%)、AAAAG/CTTTT(0.38%)、AAAAAG/CTTTTT(0.15%)。依据转录组中的SSRs序列信息,随机合成了60对引物,并对含平榛(Corylus heterophylla Fisch)、平欧杂交榛(C. heterophylla × C. avellana)、欧洲榛(C. avellana)及毛榛(C. mandshurica Maxim.)的25份材料进行了PCR扩增和毛细管电泳,找到7对多态性良好的引物,其PIC(Polymorphism Information Content)值为0.35 ~ 0.70,获得多态性条带52条;UPGMA(Unweighted Pair Group Method Analysis)聚类结果显示,上述引物可将这些种质进行准确区分。以上研究初步明确了平欧杂交榛转录组中SSR的分布特征,为其遗传连锁图谱构建等研究提供了科学依据。
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    • 黄皮转录组SSR挖掘及其可用性分析
    • 陆育生,陈 喆,常晓晓,邱继水,林志雄*,潘建平*
    • 园艺学报. 2018, 45(1): 149-158. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0342
    • 摘要 ( 236 ) HTML ( 728 ) PDF (1240KB) ( 728 )   
    • 利用MISA软件筛选黄皮(Clausena lansium)转录组测序获得的68 998条Unigene,共检测出单核苷酸至六核苷酸重复类型的SSR位点11 825个,分布于11 000条Unigene中,出现频率为17.14%,平均分布距离为4.41 kb。6种SSR位点类型中主要为单、二、三个核苷酸重复,分别占总SSR位点的41.48%、24.92%和27.53%。11 825个SSR位点中共发现207种重复基序,重复次数在4 ~ 24次之间,其中出现频率高的基序有A/T、AG/CT、AT/AT、AAG/CTT和AAT/ATT。位点序列长度分布在12 ~ 25 bp之间,其中12 ~ 15 bp最多,占50.95%(6 025个SSR位点)。通过Primer 3设计得到6 102对SSR引物,随机选择30对引物进行多态性验证分析,结果显示24对有效扩增引物中,13对引物在16份不同黄皮种质中表现出多态性。以上结果表明,黄皮转录组测序产生的Unigene信息可作为开发SSR标记的有效来源,开发的大批量SSR标记可为黄皮种质资源遗传多样性分析和遗传图谱构建提供更加丰富可靠的标记选择。
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    • 基于万寿菊转录组测序的SSR标记开发
    • 张华丽1,丛日晨1,王茂良1,董爱香1,辛海波1,*,义鸣放2,郭 华3,*
    • 园艺学报. 2018, 45(1): 159-167. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0166
    • 摘要 ( 374 ) HTML ( 814 ) PDF (1483KB) ( 814 )   
    • 万寿菊(Tagetes erecta L.)花蕾转录组测序共获得48 953条Unigene,利用MISA软件检测出20 666个SSR位点,分布于13 849条Unigene中,出现频率为28.29%,平均分布距离为2.51 kb。优势重复基序为三核苷酸、四核苷酸,分别占总SSR位点的50.16%和20.94%。ATG/ATG和AAAC/GTTT分别是三核苷酸、四核苷酸的优势重复基元,占总SSR重复类型的13.82%和3.66%。随机选取不同主导重复基元类型并合成SSR引物36对,以20份万寿菊自交系的基因组DNA为模板,对引物有效性和多态性进行了验证,30对引物可以扩增到清晰稳定的目标条带,有效扩增率为80.56%;其中13对引物具有多态性,平均He和PIC分别为0.275和0.608。以上结果表明,万寿菊转录组测序产生的Unigene信息可作为开发SSR标记的有效来源,获得的大批量SSR标记可为万寿菊的遗传多样性分析和遗传图谱构建提供可靠的标记选择。
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    • 基于牡丹类黄酮糖基转移酶基因建立VIGS技术体系
    • 舒庆艳1,*,朱 瑾1,2,*,门思琦1,2,郝 青3,王倩玉1,2,刘政安1,曾秀丽4,王亮生1,2,**
    • 园艺学报. 2018, 45(1): 168-176. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0522
    • 摘要 ( 302 ) HTML ( 959 ) PDF (734KB) ( 959 )   
    • 牡丹(Paeonia suffruticosa Andrews)花色的化学基础研究较为深入,但因其无遗传转化体系,导致花色相关基因的功能验证只能利用其他植物进行旁证。利用保守区段长分别为413和418 bp的牡丹花瓣类黄酮糖基转移酶基因PsUF3GT和PsUF5GT,通过VIGS表达载体,采用二因素三水平的试验体系对目的基因进行沉默。结果表明,PsUF3GT和PsUF5GT的表达量在花斑中(盛开期花瓣,真空抽滤15 min)和非斑中(蕾期花瓣,真空抽滤10 min)分别比空载体处理的花斑中(盛开期花瓣,真空抽滤10 min)和非斑中(蕾期花瓣,真空抽滤15 min)降低了65.0%和85.0%;花斑中总花青苷含量分别降低了24.2%和28.2%,尤其是盛开期花瓣(真空抽滤15 min)处理后3G型糖苷降低了92.2%,蕾期花瓣 (真空抽滤10 min)处理后3G5G型糖苷降低了54.9 %。由此获得了沉默PsUF3GT和PsUF5GT的适宜体系:以盛开期或者花蕾期带花柄的花朵为材料,抽真空渗透10 ~ 15 min后,置于去离子水中暗培养1 d(8 ℃,湿度60%);之后转移至23 ~ 25 ℃、湿度60%的环境,光照培养3 d后可用于检测和分析。本研究中建立的VIGS体系可有效沉默花瓣中的内源基因,为牡丹基因功能验证及其花色形成的分子机制研究奠定了基础。
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    综述

    • 植物黄酮醇生物合成及其调控研究进展
    • 曹运琳,邢梦云,徐昌杰,李 鲜*
    • 园艺学报. 2018, 45(1): 177-192. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0306
    • 摘要 ( 421 ) HTML ( 1475 ) PDF (973KB) ( 1475 )   
    • 植物黄酮醇具有广泛生物活性,其生物合成及其调控研究日益增多,逐渐成为热点。对黄酮醇生物合成关键酶(FLS、F3H、F3′H、F3′5′H、UGT)和调控因子(如MYB等转录因子)相关的生化与分子生物学研究进展进行总结,重点对相关结构基因和转录因子对黄酮醇积累发挥关键作用的试验证据进行归纳,探索调控黄酮醇物质积累的有效途径及靶标分子,以期为利用基因工程定向积累具有重要生物学功能的黄酮醇物质提供参考。
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