园艺学报 ›› 2024, Vol. 51 ›› Issue (8): 1823-1832.doi: 10.16420/j.issn.0513-353x.2023-0468
收稿日期:
2024-01-15
修回日期:
2024-04-22
出版日期:
2024-08-25
发布日期:
2024-08-21
通讯作者:
基金资助:
QIN Zilu, XU Zhengkang, DAI Xiaogang, CHEN Yingnan*()
Received:
2024-01-15
Revised:
2024-04-22
Published:
2024-08-25
Online:
2024-08-21
摘要:
对河南省南召县917份望春玉兰(Magnolia biondii)种质材料利用细胞流式仪进行基因组倍性分析,并采用SSR标记分析其遗传多样性和遗传结构。此外,采用模拟退火法分别基于遗传多样性最大化(simulated annealing algorithm based on the maximizing genetic diversity,SAGD)和等位基因最大化(simulated annealing algorithm based on maximizing allelic richness,SANA)构建望春玉兰核心种质。结果显示:所检测的望春玉兰种质材料全部为二倍体植株;10对SSR引物共检测到57个等位基因(Na),平均有效等位基因数(Ne)为2.667,Shannon’s信息指数(I)、观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)和多态性指数(PIC)分别为1.124、0.422、0.586和0.547,表明望春玉兰种质资源具有丰富的遗传多样性。群体遗传结构和聚类分析均显示,917份望春玉兰种质材料可以分为4个亚群,不同亚群之间存在明显的基因交流和渗透。基于SAGD方法构建核心种质的各遗传参数基本都高于SANA法。利用SAGD方法筛选得到183份望春玉兰核心种质,占原有种质的20%,Na、Ne、I、Ho和He的保留率分别为94.74%、105.40%、103.38%、104.27%和104.61%;主坐标分析(principal coordinate analysis,PCoA)表明构建的望春玉兰核心种质在整个原始种质的主坐标图内均匀分布,具有良好的代表性,可以为种质资源收集保存及创新利用提供科学依据。
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引物名称 Primer name | 引物序列(5′-3′) Primer sequence | 重复基序 Repeat motif | 预期产物大小/bp Expected product length |
---|---|---|---|
Chr02-1 | F:ATTGGAGCTTGGCTTGTTTG;R:GGGCCACGTTAGATTTTTCA | (TCGAG)3 | 119 |
Chr06-10 | F:CAAGCTGGCCTCTTTTGTCT;R:TGCATTCATCATATTCAGCCTC | (AAT)11 | 128 |
Chr08-5 | F:AGATTGGCGTCCTCAATAGG;R:AGTCCTGCAACAGCTCCACT | (AGAAA)3 | 125 |
Chr09-2 | F:GGATCGTCCAATTAGCAGACA;R:TCTGAGTTGACCAGCTGACG | (CAATC)3 | 138 |
Chr10-7 | F:TGGAGTCTATTAAGACTATGGCA;R:CGAAAGCCTATCTCGGATCA | (ATTATA)4 | 134 |
Chr13-5 | F:TTCCCTTTTTGCAGTTCGAG;R:GCCCTCTATAGATACGGCCTG | (GAGGC)3 | 127 |
Chr16-5 | F:CCCTTTCCTCTTCCGACTTT;R:CACATTTGCTCACGAACACC | (AAGGG)3 | 105 |
Chr17-22 | F:GTTCAAGTCGGGTCGAGGTA;R:TGGGTTTAGTCGTTCTTGGG | (ACCCA)5 | 143 |
Chr18-17 | F:TCCATGGACGACCACAGTTA;R:GCCGGGACTGCTTTTACTTA | (AAAAT)6 | 118 |
Chr19-6 | F:CAGGAACGTCCAGCTTCTCT;R:AAATTTCAATGGTCTCGGCA | (AAT)10 | 125 |
表1 SSR引物序列
Table 1 Sequence of SSR primers
引物名称 Primer name | 引物序列(5′-3′) Primer sequence | 重复基序 Repeat motif | 预期产物大小/bp Expected product length |
---|---|---|---|
Chr02-1 | F:ATTGGAGCTTGGCTTGTTTG;R:GGGCCACGTTAGATTTTTCA | (TCGAG)3 | 119 |
Chr06-10 | F:CAAGCTGGCCTCTTTTGTCT;R:TGCATTCATCATATTCAGCCTC | (AAT)11 | 128 |
Chr08-5 | F:AGATTGGCGTCCTCAATAGG;R:AGTCCTGCAACAGCTCCACT | (AGAAA)3 | 125 |
Chr09-2 | F:GGATCGTCCAATTAGCAGACA;R:TCTGAGTTGACCAGCTGACG | (CAATC)3 | 138 |
Chr10-7 | F:TGGAGTCTATTAAGACTATGGCA;R:CGAAAGCCTATCTCGGATCA | (ATTATA)4 | 134 |
Chr13-5 | F:TTCCCTTTTTGCAGTTCGAG;R:GCCCTCTATAGATACGGCCTG | (GAGGC)3 | 127 |
Chr16-5 | F:CCCTTTCCTCTTCCGACTTT;R:CACATTTGCTCACGAACACC | (AAGGG)3 | 105 |
Chr17-22 | F:GTTCAAGTCGGGTCGAGGTA;R:TGGGTTTAGTCGTTCTTGGG | (ACCCA)5 | 143 |
Chr18-17 | F:TCCATGGACGACCACAGTTA;R:GCCGGGACTGCTTTTACTTA | (AAAAT)6 | 118 |
Chr19-6 | F:CAGGAACGTCCAGCTTCTCT;R:AAATTTCAATGGTCTCGGCA | (AAT)10 | 125 |
图1 利用流式细胞仪测定的番茄(内参)和望春玉兰样品WCYL1、WCYL848、WCYL855和WCYL884的基因组大小
Fig. 1 Estimation of genome size of tomato(internal control)and Magnolia biondii samples WCYL1,WCYL848,WCYL855 and WCYL884 by using flow cytometry
引物 Primer | Na 等位基因数 Number of alleles | Ne 有效等位基因数 Number of effective alleles | Ng 基因型数 Number of genotypes | I Shannon’s指数 Shannon’s index | Ho 观测杂合度 Observing heterozygosity | He 期望杂合度 Expected heterozygosity | PIC 多态性指数 Polymorphism index |
---|---|---|---|---|---|---|---|
Chr02-1 | 6 | 2.627 | 20 | 1.275 | 0.470 | 0.619 | 0.585 |
Chr06-10 | 6 | 2.632 | 13 | 1.210 | 0.437 | 0.620 | 0.577 |
Chr08-5 | 2 | 1.616 | 3 | 0.569 | 0.174 | 0.381 | 0.309 |
Chr09-2 | 4 | 3.038 | 7 | 1.202 | 0.592 | 0.671 | 0.608 |
Chr10-7 | 6 | 3.725 | 11 | 1.429 | 0.487 | 0.732 | 0.687 |
Chr13-5 | 4 | 1.530 | 7 | 0.667 | 0.213 | 0.346 | 0.421 |
Chr16-5 | 5 | 2.414 | 9 | 1.012 | 0.349 | 0.586 | 0.498 |
Chr17-22 | 8 | 4.045 | 20 | 1.535 | 0.670 | 0.753 | 0.712 |
Chr18-17 | 6 | 1.904 | 15 | 0.974 | 0.304 | 0.475 | 0.447 |
Chr19-6 | 10 | 3.144 | 16 | 1.364 | 0.522 | 0.682 | 0.628 |
平均Mean | 5.7 | 2.668 | 12.1 | 1.124 | 0.422 | 0.586 | 0.547 |
表2 望春玉兰种质材料的遗传多样性信息
Table 2 The genetic diversity information of Magnolia biondii germplasms
引物 Primer | Na 等位基因数 Number of alleles | Ne 有效等位基因数 Number of effective alleles | Ng 基因型数 Number of genotypes | I Shannon’s指数 Shannon’s index | Ho 观测杂合度 Observing heterozygosity | He 期望杂合度 Expected heterozygosity | PIC 多态性指数 Polymorphism index |
---|---|---|---|---|---|---|---|
Chr02-1 | 6 | 2.627 | 20 | 1.275 | 0.470 | 0.619 | 0.585 |
Chr06-10 | 6 | 2.632 | 13 | 1.210 | 0.437 | 0.620 | 0.577 |
Chr08-5 | 2 | 1.616 | 3 | 0.569 | 0.174 | 0.381 | 0.309 |
Chr09-2 | 4 | 3.038 | 7 | 1.202 | 0.592 | 0.671 | 0.608 |
Chr10-7 | 6 | 3.725 | 11 | 1.429 | 0.487 | 0.732 | 0.687 |
Chr13-5 | 4 | 1.530 | 7 | 0.667 | 0.213 | 0.346 | 0.421 |
Chr16-5 | 5 | 2.414 | 9 | 1.012 | 0.349 | 0.586 | 0.498 |
Chr17-22 | 8 | 4.045 | 20 | 1.535 | 0.670 | 0.753 | 0.712 |
Chr18-17 | 6 | 1.904 | 15 | 0.974 | 0.304 | 0.475 | 0.447 |
Chr19-6 | 10 | 3.144 | 16 | 1.364 | 0.522 | 0.682 | 0.628 |
平均Mean | 5.7 | 2.668 | 12.1 | 1.124 | 0.422 | 0.586 | 0.547 |
亚群 Subgroup | 各亚群种质总数 Total number of germplasms in each subgroup | 种质数量(比例/%) Number of germplasms | |||
---|---|---|---|---|---|
Q < 0.6 | 0.6 ≤ Q < 0.8 | 0.8 ≤ Q < 0.9 | Q ≥ 0.9 | ||
Ⅰ | 271 | 74(27.3) | 85(31.4) | 67(24.7) | 45(16.6) |
Ⅱ | 163 | 44(27.0) | 40(24.5) | 38(23.3) | 41(25.2) |
Ⅲ | 243 | 52(21.4) | 63(25.9) | 58(23.9) | 70(28.8) |
Ⅳ | 240 | 60(25.0) | 56(23.3) | 66(27.5) | 58(24.2) |
合计Total | 917 | 230(25.1) | 244(26.6) | 229(25.0) | 214(23.3) |
表3 917份望春玉兰种质材料各亚群的最大Q值分布
Table 3 Distribution of maximum Q-value of each subgroup of 917 Magnolia biondii germplasms
亚群 Subgroup | 各亚群种质总数 Total number of germplasms in each subgroup | 种质数量(比例/%) Number of germplasms | |||
---|---|---|---|---|---|
Q < 0.6 | 0.6 ≤ Q < 0.8 | 0.8 ≤ Q < 0.9 | Q ≥ 0.9 | ||
Ⅰ | 271 | 74(27.3) | 85(31.4) | 67(24.7) | 45(16.6) |
Ⅱ | 163 | 44(27.0) | 40(24.5) | 38(23.3) | 41(25.2) |
Ⅲ | 243 | 52(21.4) | 63(25.9) | 58(23.9) | 70(28.8) |
Ⅳ | 240 | 60(25.0) | 56(23.3) | 66(27.5) | 58(24.2) |
合计Total | 917 | 230(25.1) | 244(26.6) | 229(25.0) | 214(23.3) |
构建方法 Construction method | 取样比例/% Sampling ration | 种质数 Number of germplasms | Na(%) | Ne(%) | I(%) | Ho(%) | He(%) |
---|---|---|---|---|---|---|---|
原始种质 Initial collection | — | 917 | 5.700 | 2.667 | 1.124 | 0.422 | 0.586 |
SANA | 10 | 92 | 5.200(91.23) | 2.650(99.36) | 1.108(98.58) | 0.404(95.73) | 0.576(98.29) |
20 | 183 | 5.400(94.74) | 2.650(99.36) | 1.121(99.73) | 0.418(99.05) | 0.586(100.00) | |
30 | 275 | 5.700(100.00) | 2.657(99.63) | 1.127(100.27) | 0.422(100.00) | 0.586(100.00) | |
40 | 367 | 5.700(100.00) | 2.664(99.89) | 1.124(100.00) | 0.428(101.42) | 0.587(100.17) | |
SAGD | 10 | 92 | 5.200(91.23) | 2.893(108.47) | 1.178(104.80) | 0.438(103.79) | 0.624(106.48) |
20 | 183 | 5.400(94.74) | 2.811(105.40) | 1.162(103.38) | 0.440(104.27) | 0.613(104.61) | |
30 | 275 | 5.700(100.00) | 2.743(102.85) | 1.152(102.49) | 0.423(100.24) | 0.606(103.41) | |
40 | 367 | 5.700(100.00) | 2.694(101.01) | 1.137(101.16) | 0.416(98.58) | 0.597(101.88) |
表4 望春玉兰不同构建策略的核心种质遗传多样性参数比较
Table 4 Comparisons of genetic diversity index of core collection of Magnolia biondii
构建方法 Construction method | 取样比例/% Sampling ration | 种质数 Number of germplasms | Na(%) | Ne(%) | I(%) | Ho(%) | He(%) |
---|---|---|---|---|---|---|---|
原始种质 Initial collection | — | 917 | 5.700 | 2.667 | 1.124 | 0.422 | 0.586 |
SANA | 10 | 92 | 5.200(91.23) | 2.650(99.36) | 1.108(98.58) | 0.404(95.73) | 0.576(98.29) |
20 | 183 | 5.400(94.74) | 2.650(99.36) | 1.121(99.73) | 0.418(99.05) | 0.586(100.00) | |
30 | 275 | 5.700(100.00) | 2.657(99.63) | 1.127(100.27) | 0.422(100.00) | 0.586(100.00) | |
40 | 367 | 5.700(100.00) | 2.664(99.89) | 1.124(100.00) | 0.428(101.42) | 0.587(100.17) | |
SAGD | 10 | 92 | 5.200(91.23) | 2.893(108.47) | 1.178(104.80) | 0.438(103.79) | 0.624(106.48) |
20 | 183 | 5.400(94.74) | 2.811(105.40) | 1.162(103.38) | 0.440(104.27) | 0.613(104.61) | |
30 | 275 | 5.700(100.00) | 2.743(102.85) | 1.152(102.49) | 0.423(100.24) | 0.606(103.41) | |
40 | 367 | 5.700(100.00) | 2.694(101.01) | 1.137(101.16) | 0.416(98.58) | 0.597(101.88) |
种质 Germplasm | 种质数 Collection number | Na | Ne | I | Ho | He |
---|---|---|---|---|---|---|
原始种质Initial collection | 917 | 5.700 | 2.667 | 1.124 | 0.422 | 0.586 |
核心种质Core collection | 183 | 5.400 | 2.811 | 1.162 | 0.440 | 0.613 |
保留种质Reserve collection | 734 | 5.700 | 2.625 | 1.106 | 0.417 | 0.577 |
t1 | 0.317 | -0.383 | -0.275 | -0.238 | -0.447 | |
t2 | -0.317 | 0.495 | 0.399 | 0.297 | 0.583 |
表5 望春玉兰核心种质、保留种质和原有种质遗传多样性比较
Table 5 Comparisons of the genetic diversity among core collection,reserved collection and initial collection of Magnolia biondii
种质 Germplasm | 种质数 Collection number | Na | Ne | I | Ho | He |
---|---|---|---|---|---|---|
原始种质Initial collection | 917 | 5.700 | 2.667 | 1.124 | 0.422 | 0.586 |
核心种质Core collection | 183 | 5.400 | 2.811 | 1.162 | 0.440 | 0.613 |
保留种质Reserve collection | 734 | 5.700 | 2.625 | 1.106 | 0.417 | 0.577 |
t1 | 0.317 | -0.383 | -0.275 | -0.238 | -0.447 | |
t2 | -0.317 | 0.495 | 0.399 | 0.297 | 0.583 |
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