芹菜胚性细胞悬浮系原生质体分离及再生植株

园艺学报 ›› 2007, Vol. 34 ›› Issue (3): 665-670.

芹菜胚性细胞悬浮系原生质体分离及再生植株

韩清霞;沈火林^*;张振贤

(中国农业大学农学与生物技术学院, 北京100094)

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2007-06-25 发布日期:2007-06-25

Protoplast Isolation and Plant Regeneration from Soma tic Embryogenic CellSuspension of Celery (Apium graveolens L. )

HAN Qing-xia, SHEN Huo-lin^*;ZHANG Zhen-xian

(Agronomy and Biotechnology College, China Agricultural University, Beijing 100094,China)

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2007-06-25 Published:2007-06-25

摘要/Abstract

摘要： 利用芹菜胚性细胞悬浮系成功分离得到大量原生质体, 获得芹菜大量原生质体的最佳反应体
系为: 酶液组成为3.0%纤维素酶Onozuka R210、1.0%离析酶R210、11%甘露醇、0.5% CaCl₂ ·2H₂O和
0.1% MES; 摇床转速为80 r/min, 温度(25 ±2) ℃, 酶解时间5～6 h; 原生质体产量为25.00 ×10⁶ /g, 原
生质体活力83.41%。原生质体浅层培养, 培养基为1 /2 MS + 1 mg/L 2, 4-D + 0.5 mg/L KT + 11%甘露
醇+ 500 mg/L水解络蛋白, 两天后, 重新再生细胞壁之后进行第1次分裂, 逐步降低渗透压至甘露醇3% ,
大约30 d形成小细胞团。小愈伤组织经增殖培养后在1 /2MS + 500 mg/L CH + 0.25 mg/L KT固体分化培养
基诱导出不定芽, 30 d后再转入MS基本培养基, 获得完整的再生植株。

关键词: 芹菜, 悬浮系, 原生质体, 再生植株

Abstract: Protop lastswere successfully isolated from embryogenic suspensions incubating in enzyme so
lution containing 3.0% cellulose Onozuka R210, 1.0% macerozyme R210, 0.5% CaCl₂ ·2H₂O, 0.1%
MES and 11% mannitol. The enzyme mixture was shaken (80 r /min) for 6 h at (25 ±2) ℃. The yield and
viability were 25.00 ×10⁶ /g and 83.41%. Purified protop lasts were cultured in mediem 1 /2 MS + 1 mg/L
2, 4-D + 0.5 mg/L KT + 11% mannitol + 500 mg/L CH initially with shallow liquid layers. Two days later,
cell wall was regenerated and simultaneously intiated the first division, through reducing manntol, mini-culli
were observed in 30 days. Shoots regenerated in medium 1 /2MS + 0.25 mg/L KT + 500 mg/L CH.

Key words: Celery, Suspension culture, Protoplast, Regeneration

韩清霞;沈火林;张振贤. 芹菜胚性细胞悬浮系原生质体分离及再生植株[J]. 园艺学报, 2007, 34(3): 665-670.

HAN Qing-xia;SHEN Huo-lin;ZHANG Zhen-xian. Protoplast Isolation and Plant Regeneration from Soma tic Embryogenic CellSuspension of Celery (Apium graveolens L. )[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2007, 34(3): 665-670.

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