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    2018年, 第45卷, 第8期 上一期    下一期

    研究论文

    • MdMYB10对苹果果皮苯丙氨酸代谢的影响
    • 张 波1,曲 东2,杨惠娟1,杨亚洲1,王 帆1,朱珍珍1,赵政阳1,*
    • 园艺学报. 2018, 45(8): 1429-1440. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0653
    • 摘要 ( 410 ) PDF (1305KB) ( 543 )   
    • MdMYB10对苹果果皮花青苷合成起重要作用,但对苯丙氨酸代谢途径中其他酚类物质合成是否起作用尚不清楚。从‘粉红女士’苹果(Malus ? domestica‘Pink Lady’)果皮中克隆了MdMYB10,分别构建其过表达载体pCAMBIA2301-MdMYB10和沉默载体pTRV2-MdMYB10,在套袋苹果果皮下注射农杆菌诱导MdMYB10过表达和沉默,分析MdMYB10对解袋后苹果果皮苯丙氨酸代谢的影响。结果表明,在过表达MdMYB10的果皮组织中,MdMYB10表达量上调了19.62倍,MdPAL、MdCHS、MdF3H、MdDFR、MdANS、MdUFGT、MdFLS、MdANR均有不同程度的上调,只有MdLAR无显著变化;沉默MdMYB10的果皮组织中,MdMYB10表达量降低了87%;MdCHS、MdF3H、MdDFR、MdANS和MdUFGT均有不同程度的下调,其中MdANS和MdUFGT下调最多,分别下调83%和82%。在过表达MdMYB10的果皮中,花青苷含量升高了3.05倍,槲皮素–3–O–半乳糖苷、表儿茶素、原花青素B2、绿原酸、对香豆酸含量均有不同程度升高,根皮苷含量无明显变化;在沉默MdMYB10的果皮中,花青苷含量降低了83%,槲皮素–3–O–半乳糖苷和表儿茶素含量分别降低58%和52%,原花青素B2、根皮苷含量无明显变化,而绿原酸含量升高了24%,对香豆酸含量升高了21%。可见,MdMYB10不仅调控苹果果皮中花青苷合成,同时还调控苯丙氨酸代谢中绿原酸、对香豆酸、槲皮素–3–O–半乳糖苷、表儿茶素和原花青素B2等物质的合成,但对根皮苷的形成作用不明显。
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    • VvmiR397a及其靶基因VvLACs在葡萄果实发育中的作用分析
    • 王文然1,王 晨1,*,解振强2,贾海锋1,汤 崴1,崔梦杰1,房经贵1
    • 园艺学报. 2018, 45(8): 1441-1455. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0059
    • 摘要 ( 149 ) PDF (2576KB) ( 434 )   
    • 以‘魏可’葡萄(Vitis vinifera‘Wink’)为试材,克隆了葡萄VvmiR397a前体基因(594 bp),其可折叠成典型的茎环结构;同时鉴定了其成熟体序列(21 bp),并为其预测到5条靶基因VvLAC4、VvLAC7、VvLAC11、VvLAC14和VvLAC17,它们属于木质素合成的关键酶漆酶家族(Laccase,LACs)。靶基因的domains、motif序列分析及三级结构预测显示,漆酶蛋白序列均具有3个相同的Cuoxidase结构域,其motif元件类型及排列顺序、三级结构均相似,表明漆酶结构较为保守。推测其功能比较保守,74个漆酶基因的进化分析显示葡萄漆酶基因与杨树漆酶基因亲缘关系近于拟南芥,葡萄漆酶基因在木本植物中的保守性高于草本植物。VvmiR397a及VvLAC4、VvLAC11、VvLAC14和VvLAC17的启动子均具有赤霉素响应顺式作用元件(TATC-box、GARE、P-box),表明它们可能响应GA参与葡萄生长发育的调控。荧光定量PCR表达分析显示,VvmiR397a能被GA诱导显著上调,且在幼果、花和成熟叶中具有高的表达,其他组织中表达相对较低,尤其在幼果中表达量最高,硬核期表达量最低;而其靶基因VvLACs表现出相反的表达模式,在硬核期有最高表达,而该期是葡萄果核木质素合成量最大的时期,表明VvmiR397a可能通过负调控VvLACs参与葡萄果核发育的调控。利用RLM-RACE和PPM-RACE验证了VvmiR397a对VvLACs的裂解作用,且在幼果中裂解作用最强,而在硬核期果实中裂解作用最弱,与VvmiR397a的表达趋势相似。
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    • 葡萄种质资源果形性状的分析
    • 张培安1,樊秀彩2,刘众杰1,吴伟民3,刘崇怀2,*,房经贵1,*
    • 园艺学报. 2018, 45(8): 1456-1466. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0709
    • 摘要 ( 246 ) PDF (1508KB) ( 479 )   
    • 通过分析葡萄种质的果形性状以及不同类型的果形特点,为认识葡萄种质资源果粒形状特点和育种亲本选择提供一定依据。选取820份葡萄种质材料(286份的性状来自田间实地调查,534份来自《中国葡萄志》和《中国葡萄品种》记载),对不同类型、种(species)和用途的葡萄果形特点、不同果形单果质量的分布、以及质量与其纵径和横径的相关性、不同年代选育不同果形的数量等进行分析。结果表明,倒卵圆形和长椭圆形的果粒较大,而圆形的果粒较小。欧亚种葡萄中长椭圆形和卵圆形的较多,欧美杂种葡萄中倒卵圆形的较多。鲜食葡萄较酿酒、制干和制汁葡萄果形更丰富且更狭长。黑色葡萄以圆形和近圆形为主,白色和红色葡萄中果形较为丰富。从育种进程来看,早期选育的葡萄果形以圆形为主,之后变为以圆形、近圆形和椭圆形为主,现代越来越多果形相继出现。圆形、卵圆形和倒卵圆形果粒的横、纵径与果粒质量拟合度较好。同一个葡萄品种果粒形状可能存在差异,其中椭圆形变化较为普遍。
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    • 香妃’和‘早玫瑰香’葡萄温室与露地栽培单萜积累差异分析
    • 孙 磊,钱 旭,张国军,闫爱玲,王晓玥,王慧玲,任建成,徐海英*
    • 园艺学报. 2018, 45(8): 1467-1478. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0843
    • 摘要 ( 142 ) PDF (1635KB) ( 394 )   
    • 温室栽培对鲜食葡萄果实单萜积累的影响尚不明确。以早熟鲜食葡萄品种‘香妃’和‘早玫瑰香’为试材进行温室栽培,以露地栽培作为对照。采用顶空固相微萃取(HS–SPME)结合气相色谱—质谱联用(GC–MS)技术,辅助自动质谱图解卷积和鉴定系统(AMDIS),检测葡萄果实中游离态单萜类化合物的含量。共检测到29种来源于异戊二烯代谢途径的单萜类化合物。两个葡萄品种单萜类化合物总含量随果实发育均呈升高趋势,且露地栽培均高于温室栽培,果实成熟期‘香妃’高于‘早玫瑰香’。利用主成分分析(PCA)可以明显区分开温室和露地栽培下的‘早玫瑰香’,但两种栽培条件下‘香妃’的单萜化合物在成熟期愈加接近;整体趋势表现为露地栽培葡萄果实具有更丰富的柠檬烯、(Z)–别罗勒烯、(E,Z)–别罗勒烯、里那醇、β–月桂烯、异松油烯、(Z)–β–罗勒烯、cis和trans–氧化玫瑰、β–香茅醇和cis–吡喃型氧化里那醇。
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    • 基于银杏花芽3个分化时期转录组测序的相关基因筛选与表达分析
    • 何崇单1,2,蔡雨蒙2,李 萌1,2,董金金2,刘 伟2,王俊燚2,王义强1,2,*
    • 园艺学报. 2018, 45(8): 1479-1490. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0023
    • 摘要 ( 194 ) PDF (1482KB) ( 540 )   
    • 鉴定银杏花芽分化调控的关键基因,揭示银杏花芽分化调控的主要分子机制,为缩短银杏童期和选育银杏早花品种提供理论指导。本研究中采用高通量测序技术对银杏花芽分化3个时期(花芽未分化期、花芽分化始期、花芽分化盛期)的样品进行转录组测序,并分析数字表达谱,筛选开花调控相关基因并进行荧光定量PCR(RT-qPCR)表达验证。转录组测序共产生27.52 Gb原始数据,注释到8大功能数据库(GO、COG、KEGG、KOG、NR、Pfam、Swiss-Prot、eggNOG)上的 unigene 总数为35 179个。通过GO分类和KEGG Pathway 富集性分析,将unigene分别归于55个GO类别和126个代谢途径。差异表达基因分析显示,花芽未分化期较花芽分化始期有2 253个基因上调,2 032个基因下调;花芽分化始期较花芽分化盛期有1 770个基因上调,1 901个基因下调;花芽未分化期较花芽分化盛期有1 865 个基因上调,2 042个基因下调。发掘出大量的开花相关的基因涉及5个开花调控途径(光周期途径、春化途径、赤霉素途径、自主途径和年龄途径)。筛选出gene.Gb_17618(GI序列)、gene.Gb_19790(FT/TFL1序列)、gene.Gb_16301(AG序列)、gene.Gb_28337(花发育MADS-box序列)、gene.Gb_01884(SOC1序列)和gene.Gb_41704(CO序列)等6个银杏花芽分化差异表达关键基因序列,荧光定量PCR检测表达水平与转录组结果一致。
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    • 柑橘CsHB1启动子的克隆及功能分析
    • 张梦原1,2,谢幸男1,李 盈1,葛晓霞1,*
    • 园艺学报. 2018, 45(8): 1491-1500. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0088
    • 摘要 ( 200 ) PDF (2379KB) ( 484 )   
    • 以‘伏令夏橙’叶片基因组DNA为模板,克隆了CsHB1启动子5′端转录起始位点上游分别为1 741 bp和1 613 bp的区域序列。序列分析表明这两个启动子区序列相似度为90.7%,存在141 bp的差异片段,该差异片段中含有2个Box4元件。通过PlantCare数据库对启动子序列的顺式作用元件进行预测,结果表明CsHB1的不同启动子序列含有多种响应元件,如胚乳特异性元件、分生组织表达元件、光反应元件、热应激反应元件、MYB 结合位点等。为进一步分析CsHB1启动子的功能,构建该基因启动子与GUS基因融合的植物表达载体prCsHB1::GUS,并用农杆菌介导法转化拟南芥,获得prCsHB1-1::GUS拟南芥纯合材料13株和prCsHB1-2::GUS拟南芥纯合材料10株。对转基因拟南芥进行GUS组织化学染色鉴定,结果表明两类启动子表达载体已成功转入拟南芥中并进行了表达,其表达部位主要集中于愈伤组织和花药中,而在种荚、叶片及幼苗中未检测到GUS蛋白的表达。
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    • 龙眼体胚发生早期miR166初级体的克隆与表达分析
    • 张清林,苏立遥,厉 雪,张舒婷,徐小萍,陈晓慧,王培育,李 蓉,张梓浩,陈裕坤,赖钟雄*,林玉玲*
    • 园艺学报. 2018, 45(8): 1501-1512. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0138
    • 摘要 ( 121 ) PDF (1603KB) ( 318 )   
    • 为了解龙眼miR166初级体基因Pri-miR166 S53结构特点及其前体和成熟体在龙眼体胚发生早期的表达模式,采用SMARTTM RACE试剂盒和PCR扩增技术克隆龙眼体胚早期miR166基因的初级体(Pri-miR166 S53),确认其转录起始位点,并预测其含有的潜在ORF;利用龙眼基因组数据库提取其启动子序列,预测其含有的顺式作用元件;用实时荧光定量PCR对龙眼体胚发生早期及不同激素处理下的胚性愈伤组织中miR166基因的前体(Pre-miR166 S53)和成熟体(miR166a.2)表达模式进行分析。结果表明:获得长317 bp的Pri-miR166 S53基因初级体序列,对其进行翻译,得到一条长13个氨基酸序列的miPEP(MLCFVDALFLIST)。利用生物信息学软件分析Pri-miR166 S53基因的启动子序列发现,除了具有 TATA/CAAT-box外,还含有生长素、脱落酸、乙烯、水杨酸、茉莉酸甲酯及spl、HSE等特异作用元件。实时荧光定量PCR分析表明,在2,4-D调控的龙眼体胚发生早期过程中,从胚性松散型愈伤组织发育到球形胚的过程中,Pri-miR166 S53基因的前体pre-miR166 S53和成熟体miR166a.2都表现为下调趋势;而在无2,4-D调控的龙眼体胚发生早期中,pre-miR166 S53和miR166a.2表达模式不同。此外,pre-miR166 S53随ABA和乙烯处理浓度升高呈下调表达,而对不同浓度2,4-D处理无应答;miR166a.2随2,4-D、ABA处理浓度升高呈下调表达,而在乙烯处理下呈上调表达。上述研究结果提示miR166前体和成熟体在对外源激素应答的模式上并不呈简单线性相关,可能存在多层次、多方位的调控。
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    • S–腺苷甲硫氨酸对黄瓜断根扦插苗生长及生理代谢的影响
    • 刘 鑫,李晓彤,荆 鑫,王硕硕,巩 彪,魏 珉,史庆华*
    • 园艺学报. 2018, 45(8): 1513-1522. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0022
    • 摘要 ( 150 ) PDF (742KB) ( 319 )   
    • 以‘津研4号’黄瓜为试验材料,研究了S–腺苷甲硫氨酸(SAM)对断根扦插后黄瓜苗期根系生长、植株生长和生理代谢的影响。结果表明,断根幼苗基部用50 μmol · L-1 SAM溶液浸泡5 min,能显著促进扦插苗根系的生长发育、叶绿素的积累、光合速率的增强以及提高植株对N、P、K的吸收能力,促进幼苗的生长。进一步分析表明,SAM处理增加了黄瓜下胚轴内多胺和生长素的积累及其相关基因的表达,可能是SAM促进黄瓜根系再生和幼苗生长发育的机理。
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    • 番茄过表达SlMYB102对种子萌发及生长的影响
    • 张 旭,陈丽琛,任仲海*
    • 园艺学报. 2018, 45(8): 1523-1534. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0001
    • 摘要 ( 250 ) PDF (2658KB) ( 374 )   
    • 番茄(Solanum lycopersicum L.)基因组中已鉴定到121个R2R3-MYB转录因子,但其中绝大多数的生物学功能仍然未知。为探究R2R3-MYB转录因子基因SlMYB102的功能,从‘Micro-Tom’番茄中,利用PCR技术克隆了SlMYB102的编码区,全长为1 089 bp。保守结构域和系统进化树分析显示,SlMYB102蛋白包含两个保守的MYB结构域,与马铃薯的StMYB34同源性最高。亚细胞定位结果显示,SlMYB102编码的蛋白定位于细胞核中。SlMYB102在根、茎、叶、花和未绿熟、红熟果实中均有表达,在茎、叶、花中表达量较高。利用农杆菌介导,将35S::SlMYB102转入番茄,获得了两个过表达株系。与野生型相比,过表达株系种子萌发速率明显升高,而植株高度、叶面积、地上部及地下部的鲜质量均显著降低。显微观察结果表明,与野生型相比,过表达株系叶片表皮细胞面积大小并没有变化,推测过表达SlMYB102是通过减少细胞分裂来抑制番茄植株的生长。
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    • 辣椒bZIP家族基因的鉴定与表达分析
    • 魏瑞敏1,2,郑井元1,刘 峰1,马艳青1,李雪峰1,杨博智1,邹学校1,谢玲玲1,*,戴雄泽1,*
    • 园艺学报. 2018, 45(8): 1535-1550. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0033
    • 摘要 ( 172 ) PDF (2978KB) ( 586 )   
    • 利用生物信息学的方法对辣椒bZIP家族基因进行全面鉴定与进化分析,并在此基础上对基因染色体定位、蛋白质保守基序和基因结构等进行分析,并通过qRT-PCR方法检测基因的组织表达模式和在ABA胁迫下的应答等。结果表明,从辣椒基因组中共鉴定出54个bZIP家族基因,这些基因分散分布在辣椒的11条染色体上;系统进化分析表明辣椒bZIP基因家族可以分为10组,每组所含有的基因数不等;该家族成员每个基因含有0 ~ 11个内含子;bZIP家族基因具有不同的表达模式;外源激素ABA处理可以明显抑制或者激活该家族基因成员的表达。
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    • 基于全基因组序列的马铃薯SSR标记开发与连锁图谱加密
    • 肖桂林1,徐竹清1,曹红菊1,李竟才2,夏军辉1,*,宋波涛1
    • 园艺学报. 2018, 45(8): 1551-1562. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0301
    • 摘要 ( 118 ) PDF (1078KB) ( 279 )   
    • 本研究检索了马铃薯全基因组范围内的SSR序列,并分析了其分布特点。通过开发设计位于目标染色体上的SSR引物,对连锁图谱进行加密和低温糖化抗性QTL定位。结果表明,马铃薯基因组上分布着28 609条SSR序列,平均分布于12条染色体上。其中2碱基、3碱基和4碱基基序SSR序列分别有15 943、11 053和1 613条,富含A或T的SSR数分别占2碱基、3碱基和4碱基基序SSR总数的88.6%、45.0%和26.0%。根据SSR序列两侧保守的侧翼序列,设计了位于5号染色体(chr05)上的SSR引物40对,其中有35对能有效扩增,20对引物的目标片段有多态性,13对引物的32个多态性位点定位到chr05上,将平均标记间距从9.0 cM缩小为1.7 cM,低温糖化抗性QTL的2 LOD置信区间从26.0 cM缩小为4.0 cM;6号染色体(chr06)上新设计SSR引物59对,有54对能有效扩增,25对引物的目标片段有多态性,12对引物的30个多态性位点被定位到chr06上,将平均标记间距从5.5 cM缩小为3.5 cM,低温糖化抗性QTL区间从9.0 cM缩小为3.7 cM。研究结果为抗低温糖化QTL的图位克隆奠定了良好基础,为马铃薯抗低温糖化分子育种提供了辅助标记。
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    • 马铃薯行株距比对光合特性及产量品质的影响
    • 杨晓璐,杨 航,王季春*,安建刚,陈隆通,王 星
    • 园艺学报. 2018, 45(8): 1563-1574. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0096
    • 摘要 ( 130 ) PDF (732KB) ( 407 )   
    • 为了研究马铃薯在相同种植密度下高产优质最佳的行株距,采用37 500和60 000株 ? hm-2两种密度,通过扩大行距缩小株距,分别设置4个和7个行株距比处理,研究其对马铃薯茎叶干物质积累、光分布、光合特性、叶绿素荧光特性、产量及块茎淀粉、蛋白质、维生素C、还原糖含量的影响。结果表明:行株距比在低密度下为1.5、高密度下为2.5时,可提高茎叶干物质量、叶面积指数、叶绿素含量、净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、气孔导度(Gs)、最大光能转化效率(Fv/Fm)、实际光化学量子效率(PSⅡ)、光化学猝灭系数(qP)、鲜薯产量及其淀粉、维生素C、可溶性蛋白含量,而胞间CO2浓度(Ci)、非光化学猝灭系数(NPQ)和还原糖含量的变化规律与之相反。‘青薯9号’高产优质的行距/株距在37 500和60 000株 ? hm-2种植密度下,分别为63.3 cm /42.2 cm和64.6 cm /25.8 cm。
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    • 乙烯对‘班克海尔’和‘杨妃出浴’芍药切花开放和衰老的影响
    • 杨若雯*,张 萍*,薛玉前,薛璟祺,王顺利**,张秀新**
    • 园艺学报. 2018, 45(8): 1575-1586. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0874
    • 摘要 ( 124 ) PDF (1787KB) ( 357 )   
    • 以‘班克海尔’和‘杨妃出浴’芍药切花为试材,研究了乙烯利处理对切花开放和衰老的影响;同时从中克隆得到乙烯生物合成和信号转导的9个关键基因PlACS、PlACO、PlACO5、PlETR1、PlERS1、PlETR2、PlEIN4、PlCTR1和PlEIN3,利用qRT-PCR分析这些基因的表达模式。结果表明:‘班克海尔’正常瓶插寿命长于‘杨妃出浴’,两品种均对乙烯敏感;乙烯利明显促进‘班克海尔’花朵开放和衰老进程,抑制‘杨妃出浴’花朵开放进程,并且出现僵花、衰老萎蔫。基因序列分析表明,乙烯合成和信号转导基因在两种切花品种中高度保守,保守性在98%以上。qRT-PCR分析表明,瓶插12 ~ 36 h,乙烯诱导两品种中除PlEIN3外的所有基因上调。瓶插0 ~ 12 h,‘杨妃出浴’中9个基因表达量均较高,内源乙烯合成和乙烯信号转导较为活跃,而在24 ~ 36 h,外源乙烯使‘班克海尔’乙烯生物合成基因表达量升高,乙烯信号转导基因表达量普遍高于‘杨妃出浴’。推测‘杨妃出浴’自身合成乙烯的时间较早,对乙烯的反应比‘班克海尔’更为敏感,‘班克海尔’乙烯反应类型可能为末期上升型,而‘杨妃出浴’为乙烯跃变型;两种芍药切花对乙烯的敏感程度以及花朵开放和衰老进程不同,可能与其乙烯生物合成和信号转导相关基因表达模式不同有关。
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    研究报告

    • 福建西番莲上首次检出东亚西番莲病毒
    • 谢丽雪,张立杰,张小艳,郑 姗,李 韬*
    • 园艺学报. 2018, 45(8): 1587-1594. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0116
    • 摘要 ( 133 ) PDF (792KB) ( 338 )   
    • 为明确东亚西番莲病毒(East Asian passiflora virus,EAPV)在福建西番莲上的发生情况,采用血清学和RT-PCR检测技术对采集的西番莲病样进行检测,并对阳性样品PCR产物进一步克隆、测序和序列分析。结果表明,11份样品的马铃薯Y病毒属(Potyvirus)病毒血清学检测结果为阳性,大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)血清学检测结果均为阴性;应用Potyvirus属通用引物从11份样品中扩增得到预期大小约660 bp的目的片段,序列比对发现,其中10份阳性样品与已报道的夜来香花叶病毒(Telosma mosaic virus,TeMV)核苷酸序列高度一致,1份样品与已报道的EAPV核苷酸序列一致性超过98.3%。针对EAPV疑似样品(命名为FJBXG-P1),利用特异性引物扩增得到预期大小约955 bp的目的片段,获得的外壳蛋白(Coat protein,CP)基因序列全长870 bp(GenBank登录号:MG650164)。序列比对发现,EAPV分离物FJBXG-P1的CP基因序列与已报道的EAPV核苷酸序列、氨基酸序列一致性分别为81.0% ~ 97.6%和84.0% ~ 96.9%;系统发育分析结果表明,38个EAPV分离物在系统发育关系上聚为两簇(GroupⅠ和GroupⅡ),其中GroupⅠ为AO株系,GroupⅡ为IB株系,FJBXG-P1分离物属于AO株系。福建西番莲上EPAV的检出,是该病毒在中国大陆地区发生的首次报道。
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    • 建兰花发育相关B、C和E类MADS-box基因的表达分析
    • 向 林1,陈 跃2,陈丽萍2,孙崇波2,3,*
    • 园艺学报. 2018, 45(8): 1595-1604. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0639
    • 摘要 ( 132 ) PDF (1053KB) ( 340 )   
    • 开花植物中B、C和E类MADS-box基因控制花雄蕊和雌蕊的合成。以具有高度进化蕊柱(雄蕊和雌蕊合生)的建兰为材料,从已有转录组中搜索到14个B、C和E类基因,包括GLO、DEF、AG、SEP和AGL6类基因,并进行实时荧光定量表达分析,发现CeDEF1和CeAGL6-1在萼片和花瓣中大量表达,唇瓣中微量表达;CeDEF3、CeDEF4和CeAGL6-3则在唇瓣和蕊柱中大量表达,在萼片和花瓣中几乎不表达;CeAG1和CeAG2主要在蕊柱中表达;而且CeDEF3、CeDEF4、CeAG1、CeAG2和CeAGL6-3在蕊柱突变体‘新品梅’的蕊柱状花瓣中的表达量比‘铁骨素’花瓣中高很多,说明这几个基因在建兰蕊柱的形成过程中可能扮演关键角色。
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    新技术与新方法

    • 应用DTBIA技术快速检测柑橘黄龙病菌研究
    • 丁 芳1,2,6,王清廉2,徐国亮1,周佳乐1,曾继吾3,严 翔4,夏长秀4,郭 俊5,刘永忠2,洪 霓1,6,王国平1,6,彭抒昂2,*,John S
    • 园艺学报. 2018, 45(8): 1605-1612. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0093
    • 摘要 ( 145 ) PDF (2113KB) ( 303 )   
    • 柑橘黄龙病病原菌为韧皮部限制性寄生菌Candidatus Liberibacter,迄今为止尚未成功获得离体纯培养。因此基于特异性抗体的高通量血清学检测技术迄今尚未开发。本实验室前期研究利用异源表达重组黄龙病菌外膜蛋白OmpCLas免疫动物,制备并获得了特异性多克隆抗体(Anti-OmpCLas-Pab)。本研究利用直接组织印迹免疫法(Direct tissue blot immunoassay,DTBIA)技术对获得的多克隆抗体的检测效果进行了初步评价,证实该抗体可以特异性识别中国不同地理来源的柑橘黄龙病菌分离物;柑橘叶柄、叶片中脉、枝条、根部、果梗和种子中均存在黄龙病菌,其中根部和种子中的病菌含量相对较低,枝条和叶片中脉中的含量较高。该多克隆抗体的获得为后续快速检测试剂盒或试纸条的研发奠定了基础。
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    • 马铃薯S病毒PVSO株系RT-LAMP检测方法的建立及应用
    • 李华伟,许泳清,罗文彬,纪荣昌,刘中华,许国春,张 鸿,李国良,林赵淼,邱永祥,邱思鑫,汤 浩*
    • 园艺学报. 2018, 45(8): 1613-1620. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0164
    • 摘要 ( 108 ) PDF (1994KB) ( 355 )   
    • 为建立一种马铃薯S病毒普通株系PVSO快速、灵敏的RT-LAMP可视化检测方法。根据马铃薯S病毒普通株系的CP核苷酸序列设计4条引物,以感染PVS的马铃薯叶片总RNA为模板,采用一步法RT-LAMP,在62 ℃下反应60 min,扩增产物利用琼脂糖电泳分析和钙黄绿素染料显色判断结果,同时对其特异性和灵敏性进行测定。结果表明,建立的RT-LAMP方法可特异地对PVSO进行检测,检测灵敏度为RT-PCR的100倍。对33份马铃薯样品检测表明,RT-LAMP与RT-PCR方法检测结果基本一致。因此建立的PVSO的 RT-LAMP可视化检测方法简便,特异性强,灵敏度高,适合PVSO的快速检测。

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    新品种

    • 早熟苹果新品种‘华丹’
    • 张瑞萍,阎振立*,张恒涛,刘珍珍,高启明,过国南
    • 园艺学报. 2018, 45(8): 1621-1622. DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2017-0561
    • 摘要 ( 146 ) PDF (1147KB) ( 309 )   
    • ‘华丹’是以‘美八’与‘麦艳’杂交育成的早熟苹果新品种。果实近圆形,高桩,平均单果质量160 g;果实底色黄白,果面着鲜红色。果肉白色,肉质中细、松脆,风味酸甜,品质优良。果肉硬度6.3 kg · cm-2,可溶性固形物含量12.3%,可滴定酸含量0.49%。郑州地区果实7月初成熟,果实发育期80 ~ 85 d。盛果期产量可达45.0 t · hm-2。田间表现抗苹果枝干轮纹病和腐烂病,适宜在‘嘎拉’苹果种植区发展。
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