根癌农杆菌介导的韭菜基因转化体系的建立

园艺学报 ›› 2003, Vol. 30 ›› Issue (1): 39-42.

根癌农杆菌介导的韭菜基因转化体系的建立

张松¹;达克东¹;姜璐琰¹;曹辰兴¹;温孚江²

(¹ 山东农业大学园艺学院, 泰安271018 ;² 山东农业大学生命科学学院, 泰安271018)

收稿日期:2001-12-22 修回日期:2002-05-08 出版日期:2003-02-25 发布日期:2003-02-25

Agrobacterium tumefaciens-mediated Transformation of Chinese Chive ( Alliumtuberosum Rottl . ex Spreng. )

Zhang Song¹;Da Kedong¹;Jiang Luyan¹;Cao Chenxing¹;Wen Fujiang²

(¹ College of Horticulture,² College of Life Sciences , Shandong Agricultural University , Tai’an 271018 , China

Received:2001-12-22 Revised:2002-05-08 Online:2003-02-25 Published:2003-02-25

摘要/Abstract

摘要： 以GUS 基因为报告基因, 建立了农杆菌介导的韭菜基因转化体系。研究结果表明, 以预培养
4～6 d 的根尖为转化受体, 用OD₆₀₀0. 6 ～0. 8 的LBA4404 浸染2～5 min , 共培养2 d , 然后在MS + NAA1 mg/L + BA 2 mg/L + Km 25 mg/L + Timentin 400 mg/L + As 100 mg/L 培养基上培养40 d , 后有愈伤组织产生,转入光下培养20 d 后有少量绿色不定芽产生。经X-Gluc 染色、PCR 分析和Southern blot 检验, GUS 基因已经整合到韭菜基因组染色体上。

关键词: 韭菜, 根癌农杆菌, 基因转化

Abstract: Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation system was established using GUS gene as a reporter and transgenic plantlets were obtained. The procedure was as following : root tips from 7 to 10 day-old seedlings were procultured on MS medium supplemented with 1 mg/ L NAA and 2 mg/ L BA. Then they were infected by Agrobacteium tumef aciens LBA4404 at OD₆₀₀0. 6 - 0. 8 for 2 to 5 mins. Transformants were selected on MS medium supplemented with 1 mg/ L NAA , 2 mg/ L BA , Km 25 mg/ L , Timentin 400 mg/ L and acetosyringone 100 mg/ L. The regenerated plants were tested by X-Gluc staining , PCR analysis and Southern blot , which showed the GUS gene was integrated into Chinese chive genome.

Key words: Chinese chive, Agrobacterium tumefaciens, Transformation

中图分类号:

633. 3

张松;达克东;姜璐琰;曹辰兴;温孚江. 根癌农杆菌介导的韭菜基因转化体系的建立[J]. 园艺学报, 2003, 30(1): 39-42.

Zhang Song;Da Kedong;Jiang Luyan;Cao Chenxing;Wen Fujiang. Agrobacterium tumefaciens-mediated Transformation of Chinese Chive ( Alliumtuberosum Rottl . ex Spreng. )[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2003, 30(1): 39-42.

[1]	高晓梅, 吕国忠, 李杨, 敖静, 刘晓辉, 孙玉禄. 设施韭菜根腐病致病镰孢菌鉴定及生物学特性研究[J]. 园艺学报, 2022, 49(4): 893-906.
[2]	李延龙，张华敏*，崔蕴刚，陈建华，吕爱芹，李纪军，李艺潇. 韭菜全长转录组SSR信息分析及分子标记开发[J]. 园艺学报, 2020, 47(4): 759-768.
[3]	张丽丽1,2，王燕霞1,3，张昊4，成晓华1，张莹1，王英1，师校欣1,，杜国强1,. β–1,3葡聚糖酶基因转化提高苹果对斑点落叶病的抗性[J]. 园艺学报, 2017, 44(6): 1029-1037.
[4]	万亚男，王晓芳，罗章，余垚，王琪，郭岩彬，李花粉*. 不同形态硒对韭菜吸收富集及土壤累积硒的影响[J]. 园艺学报, 2017, 44(4): 703-711.
[5]	牛庆霖, 曹帮华, 王玉山, 刘静, 赵进红, 罗磊, 黄艳艳, 冯殿齐. 利用沙冬青抗寒基因AmEBP1 转化杏的研究[J]. 园艺学报, 2014, 41(5): 825-832.
[6]	惠志明, 蒋钟仁, 张树根, 邢永萍, 李春玲. 韭菜新品种‘海韭 2 号’[J]. 园艺学报, 2012, 39(10): 2089-2090.
[7]	惠志明;蒋钟仁;张树根;邢永萍;李春玲 . 韭菜新品种‘海韭1号’ [J]. 园艺学报, 2011, 38(4): 811-812.
[8]	曹岩坡;高志奎;何俊萍;王梅;高荣孚. 外源水杨酸对韭菜硝酸盐累积及还原同化的影响[J]. 园艺学报, 2009, 36(3): 415-420.
[9]	孙清荣;孙洪雁;赵衍;海门得·茹斯;戴维斯·罗伯特 . 梨韧皮部特异表达启动子AtSUC2驱动下的GUS基因的转化和表达[J]. 园艺学报, 2008, 35(4): 487-492.
[10]	张妙彬;梁擎中;肖浩;岑鹏;范干群;潘丽晶. 农杆菌介导石斛兰遗传转化的研究[J]. 园艺学报, 2008, 35(4): 565-570.
[11]	叶霞;黄晓德;姚泉洪; 章镇. 农杆菌介导菜豆铁结合蛋白基因(PvFer)转化番茄的研究[J]. 园艺学报, 2007, 34(2): 489-492.
[12]	汤绍虎;孙　敏;廖志华;周启贵;李道高. 根癌农杆菌介导Cry1Ac基因转化‘雪青’梨获得转基因植株[J]. 园艺学报, 2007, 34(1): 59-62.
[13]	冯　辉;翟玉莹. 韭菜多胚苗及其与无融合生殖关系的研究[J]. 园艺学报, 2007, 34(1): 225-226.
[14]	王爱菊;张凤美;鹿金颖;赵祥云;贾　旭;刘　敏. 农杆菌介导的百合遗传转化体系的建立[J]. 园艺学报, 2006, 33(3): 664-666.
[15]	马树彬;郭瑞林;聂玉霞;孟会琴. 韭菜产量性状配合力及其遗传分析[J]. 园艺学报, 2006, 33(1): 78-83.