矮牵牛B-box型锌指蛋白基因PhBBX8的克隆与表达分析

园艺学报 ›› 2014, Vol. 41 ›› Issue (12): 2437-2445.doi:

矮牵牛B-box型锌指蛋白基因PhBBX8的克隆与表达分析

宁露云，李蓓，李佩，包满珠，张蔚

华中农业大学园艺林学学院，园艺植物生物学教育部重点实验室，武汉430070

出版日期:2014-12-25 发布日期:2014-12-25
基金资助:
国家自然科学基金项目（31101576）；中央高校基本科研业务费专项基金项目（2013PY090）；教育部高等学校博士学科点专项科研基金项目（20110146120040）

Cloning and Expression Analysis of a B-box-type Zinc-finger Protein Gene PhBBX8 in Petunia hybrida

NING Lu-Yun, LI Bei, LI Pei, BAO Man-Zhu, ZHANG Wei

Key Laboratory of Horticultural Plant Biology（Ministry of Education），College of Horticulture & Forestry Sciences，Huazhong Agricultural University，Wuhan 430070，China

Online:2014-12-25 Published:2014-12-25

摘要/Abstract

摘要： 利用矮牵牛（Petunia hybrida）基因表达谱芯片筛选出应答低温胁迫的相关基因，从中发现1个B-box型锌指蛋白基因PhBBX8。通过RT-PCR克隆得到该基因的编码区序列（CDS），为1 242 bp，预测其编码氨基酸413 aa，N端含有2个B-box盒，C端含有1个CCT结构域。系统进化树分析发现，PhBBX8与拟南芥AtBBX8等聚类为一支。利用半定量RT-PCR检测其在根、茎、叶和花中的表达特性，结果表明该基因在花中表达量较高，其次为根，而在茎和叶中表达较弱；利用实时定量PCR检测了在低温、干旱、ABA、MeJA、高盐和高渗胁迫处理下矮牵牛叶片中PhBBX8的诱导表达情况，结果表明，PhBBX8表现出不同程度的上调，其中除干旱胁迫外，其他胁迫下上调倍数都较高，初步推测该基因与矮牵牛应答低温等非生物逆境相关。

关键词: 矮牵牛, B-box, 锌指蛋白, 非生物逆境, 表达分析

Abstract: Gene expression microarray of petunia was applied to select cold responsive gene，from which a B-box-type zinc-finger protein gene PhBBX8 was discovered. The full length of the coding region of PhBBX8 amplified by RT-PCR was 1 242 bp，and the product of PhBBX8 gene was predicted to consist of 413 amino acid residuals containing two B-box domains at the N-terminal and one CCT domain at the C-terminal. The phylogenetic tree analyses showed that PhBBX8 was clustered in the same branch with AtBBX8 in Arabidopsis. By semi-quantitative RT-PCR，PhBBX8 was found to express differentially in all the tissues detected，including root，stem，leaf and flower. Stress induced expression analysis by real-time quantitative PCR showed that the expression of PhBBX8 could be induced not only by cold，but also by drought，ABA，MeJA，salt and hypertonic stresses in different degrees，suggesting PhBBX8 gene was associated with the responses of cold and other abiotic stresses.

Key words: Petunia hybrida, B-box, zinc-finger protein, abiotic stress, expression analysis

中图分类号:

S 681.9

宁露云, 李蓓, 李佩, 包满珠, 张蔚. 矮牵牛B-box型锌指蛋白基因PhBBX8的克隆与表达分析[J]. 园艺学报, 2014, 41(12): 2437-2445.

NING Lu-Yun, LI Bei, LI Pei, BAO Man-Zhu, ZHANG Wei. Cloning and Expression Analysis of a B-box-type Zinc-finger Protein Gene PhBBX8 in Petunia hybrida[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2014, 41(12): 2437-2445.

[1]	田绍泽1，刘思禹1,2，王坤1，岳远征1,3，马方芳1，杨赵楠1，殷倩1，胡惠蓉1,*. 矮牵牛花发育相关基因PhTs2的克隆及功能分析[J]. 园艺学报, 2020, 47(6): 1087-1097.
[2]	张燕，许申平，梁芳，蒋素华，袁秀云，牛苏燕，崔波*. 蝴蝶兰PhSVP的克隆及其在花发育过程中的表达分析[J]. 园艺学报, 2020, 47(6): 1111-1125.
[3]	乔永刚*，王勇飞，曹亚萍，贺嘉欣，贾孟君，李政，张鑫瑞，宋芸. 药用蒲公英低温和高温胁迫下内参基因筛选与相关基因表达分析[J]. 园艺学报, 2020, 47(6): 1153-1164.
[4]	刘婧愉，滕瑞敏，李辉，刘昊，庄静**. 茶树DHAR酶基因的克隆与非生物胁迫响应分析[J]. 园艺学报, 2020, 47(5): 983-994.
[5]	王静1，谭放军1，梁成亮1，张西露1，欧立军1，Niran Juntawong3，王飞2，焦春海2，邹学校1,，陈文超2,. 辣椒热激蛋白HSP90家族基因鉴定及分析[J]. 园艺学报, 2020, 47(4): 665-674.
[6]	熊飞 1,2，卢秦华 1，房婉萍 2，杨亚军 1，王新超 1，朱旭君 2,，王玉春 1,. 基于全基因组的茶树 PAL 家族基因鉴定及其在生物与非生物胁迫下的表达分析[J]. 园艺学报, 2020, 47(3): 517-528.
[7]	刘偲 1,4,，席婉 1,2,，袁金梅 1,2，朱琳琳 1,2，陈洪国,3 邹晶晶 3，郑日如 1,2,**，王彩云. 桂花‘莲籽丹桂’芳樟醇合酶基因 OfTPS5 的克隆及功能鉴定[J]. 园艺学报, 2020, 47(2): 310-320.
[8]	赵喜娟 1,2，张会灵 1,*，侯娟 2,3，张菊平 1，陈苏丹 1，宋波涛 2. 过表达 SbRFP1 基因提高马铃薯组培苗的耐盐性[J]. 园艺学报, 2020, 47(2): 381-389.
[9]	崔波1,*，郝平安2，梁芳1，张燕1，王喜蒙1,4，李俊霖1,3，蒋素华1，许申平1. 蝴蝶兰AP2/ERF家族基因的克隆及在低温下表达特性分析[J]. 园艺学报, 2020, 47(1): 85-97.
[10]	张映，赵悦琪，陈钰辉，连勇，刘富中*. 茄子紫色形成的分子研究进展[J]. 园艺学报, 2019, 46(9): 1779-1796.
[11]	张婷婷，康慧，付璐璐，由春香，王小非，郝玉金. 苹果MdCYP707A 家族基因表达分析和MdCYP707A1 的功能鉴定[J]. 园艺学报, 2019, 46(8): 1429-1444.
[12]	董玉梅，孙建磊，王崇启，肖守华，高超，焦自高. 甜瓜syntaxin家族基因鉴定及其对白粉病菌响应分析[J]. 园艺学报, 2019, 46(8): 1531-1542.
[13]	张慧琳，朱婉，田丽，张蔚*. 矮牵牛冷响应转录因子PhZPT2-12的特性及表达分析[J]. 园艺学报, 2019, 46(8): 1543-1552.
[14]	宋杨，刘红弟，王海波，张红军，刘凤之. 越橘花青苷合成相关基因VcTTG1的克隆与功能鉴定[J]. 园艺学报, 2019, 46(7): 1270-1278.
[15]	陈英平1，王芳1,2,*，王舰1,2，孙海宏1,2，贺苗苗1,2. 马铃薯StRcd1基因克隆及其在非生物胁迫下的表达分析[J]. 园艺学报, 2019, 46(6): 1163-1171.