百合无症病毒CP基因的克隆及其RNA i载体的构建

园艺学报 ›› 2009, Vol. 36 ›› Issue (6): 885-890.

百合无症病毒CP基因的克隆及其RNA i载体的构建

徐品三^1*;尹雅蕾¹;李玉花²

(¹大连理工大学环境与生命学院, 辽宁大连116024;²东北林业大学生命科学学院, 哈尔滨150040)

收稿日期:2009-01-19 修回日期:2009-05-11 出版日期:2009-06-25 发布日期:2009-06-25
通讯作者: 徐品三

Cloning of Lily symptomless virus CP Gene and Construction of Its RNAi Vector

XU Pin-san^1*,YIN Ya-lei¹, and LI Yu-hua²

(¹School of Environm ental and B iological Science and Technology, Dalian University of Technology, Dalian, L iaoning 116024,China; ²College of Life Sciences, Northeast Forestry University, Harbin 150040, China)

Received:2009-01-19 Revised:2009-05-11 Online:2009-06-25 Published:2009-06-25
Contact: XU Pin-san

摘要/Abstract

摘要： 以感染百合无症病毒(LSV) 的百合叶片总RNA为模板, 利用反转录聚合酶链式反应(RT2
PCR) 扩增出了876 bp的LSV CP基因, 经Blast比对发现该片段与GenBank上发表的LSV CP基因序列高度同源, 同源率98% , 由该序列推导出的氨基酸序列相似性达到98%。应用Gateway技术将扩增的片段通过BP反应连接到入门载体pDONR201, 并进行序列测定, 再通过LR反应将目的片段插入到RNAi植物表达载体pH7GW IWG2 ( Ⅱ) , 成功构建了适合农杆菌介导的百合转化的RNAi载体。

关键词: 百合, 无症病毒, CP基因, 克隆载体, RNA干扰, Gateway技术

Abstract: A fragment of 876 bp of Lily symptomless virus (LSV) CP gene cDNA sequence was amp lified by reverse transcrip tion polymerase chain reaction (RT-PCR) from the total RNA infected lily leaves. The Blast result showed that the sequence p resented a very high match with the LSV CP genes in the GenBank and its homology was 98%. The amino acid sequence was 98% homologus. Using Gateway technology, a entry clone vector (pDONR201) was constructed through the way of BP cloning and a RNA interference (RNAi) transformation vector (pH7GW IWG2) was constructed through the way of LR cloning. The RNAi vector was obtained and could be transformed into lily by Agrobacterium tum efaciens.

Key words: lily, Lily symptomless virus, CP gene, cloning vector, RNA interference, Gateway technology

中图分类号:

徐品三;尹雅蕾;李玉花. 百合无症病毒CP基因的克隆及其RNA i载体的构建[J]. 园艺学报, 2009, 36(6): 885-890.

XU Pin-san;YIN Ya-lei;and LI Yu-hua. Cloning of Lily symptomless virus CP Gene and Construction of Its RNAi Vector[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2009, 36(6): 885-890.

[1]	樊金萍, 戴静琪, 江翼帆, 闫凯丽, 张金柱, 杨涛, 车代弟. 百合新品种‘冰粉皇后’[J]. 园艺学报, 2022, 49(S2): 205-206.
[2]	王静, 徐雷锋, 王令, 祁先宇, 宋蒙, 曹雨薇, 何国仁, 唐玉超, 杨盼盼, 明军. 百合花色表型数量分类研究[J]. 园艺学报, 2022, 49(3): 571-580.
[3]	王福生, 刘晓纳, 徐媛媛, 刘小丰, 朱世平, 赵晓春. 柑橘SQS基因的克隆及功能分析[J]. 园艺学报, 2021, 48(9): 1641-1652.
[4]	范旭东, 董雅凤, 张尊平, 任芳, 胡国君, 张梦妍, 李晨. 中国葡萄卷叶相关病毒7检测及基因变异分析[J]. 园艺学报, 2021, 48(2): 347-354.
[5]	宋蒙, 徐雷锋, 曹雨薇, 杨盼盼, 毕蒙蒙, 何国仁, 唐玉超, 王静, 明军. 百合中车前草花叶病毒的实时荧光定量PCR检测[J]. 园艺学报, 2021, 48(12): 2497-2505.
[6]	王青, 吕彤, 吕英民. 百合花被片的结构和色素成分对花色的影响[J]. 园艺学报, 2021, 48(10): 1873-1884.
[7]	余鹏程, 谭平宇, 高丽, 贾桂霞. OT百合杂交育种历程中的花色演变分析[J]. 园艺学报, 2021, 48(10): 1885-1894.
[8]	毕蒙蒙, 曹雨薇, 宋蒙, 唐玉超, 何国仁, 杨悦, 杨盼盼, 徐雷锋, 明军. 百合花色研究进展[J]. 园艺学报, 2021, 48(10): 2073-2086.
[9]	李润根, 曾慧兰, 卢其能, 黄琴, 颜德聪. 百合枯萎病菌Fusarium commune的鉴定及其对杀菌剂敏感性研究[J]. 园艺学报, 2021, 48(1): 162-172.
[10]	廖晓珊, 周俊, 荣朵艳, 林庆丹, 邓雅文, 郑思乡, . 东方百合新品种‘嫦娥奔月’[J]. 园艺学报, 2020, 47(S2): 3045-3046.
[11]	梁巧兰*，魏列新，徐秉良，张树武，韩亮. 深绿木霉T2蛋白质TraT2A诱导处理对接种灰霉菌百合光响应和荧光特性的影响[J]. 园艺学报, 2020, 47(4): 769-778.
[12]	黄尧瑶1，邓明华2，彭春秀2，文锦芬1,*. 百合花瓣抗氧化酶系统对干旱胁迫响应的研究[J]. 园艺学报, 2020, 47(4): 788-796.
[13]	王莉爽, 李淳, 杨学辉, 张松柏, 刘勇, . 贵州辣椒叶脉黄化病毒分离物检测及其P0、CP、MP基因进化分析[J]. 园艺学报, 2020, 47(12): 2415-2426.
[14]	岳玲, 赵兴华, 冯秀丽, 吴海红, 李丹. 百合新品种‘舞娘’[J]. 园艺学报, 2020, 47(11): 2275-2276.
[15]	冯秀丽, 岳玲, 赵兴华. 百合新品种‘太阳花’[J]. 园艺学报, 2020, 47(10): 2069-2070.