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园艺学报 ›› 2009, Vol. 36 ›› Issue (S): 1958-1958.

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白菜脂质转移蛋白基因的反义RNA验证

田爱梅1,2;曹家树2   

  1. (1三峡大学化学与生命科学学院,湖北宜昌 443002;2浙江大学蔬菜研究所,杭州 310029)
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2009-12-26 发布日期:2009-12-26

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2009-12-26 Published:2009-12-26

摘要: 雄性不育是植物中普遍存在的一种现象,但植物雄性不育产生的机理极其复杂。研究花粉特异表达基因在花粉发育过程中的功能,对于阐明植物花粉发育的分子机理和调控作物育性具有重要的理论意义和实用价值。
脂质转移蛋白是植物生命活动中一类重要的活性蛋白。近几年有关脂质转移蛋白的生理功能的研究在不断深入,而其确切的作用机理,尤其是在植物生殖发育方面的功能尚无定论。所以,对该基因的功能进行验证具有重要的理论意义,也为进一步探索花粉发育的分子机制奠定基础。
根据普通白菜雄性不育相关的脂质转移蛋白基因的cDNA序列设计特异引物,从普通白菜花蕾cDNA中扩增出312 bp的片段,然后将该片段连接至双元载体pBI12l中,得到反义RNA植物表达载体。通过组织培养途径和农杆菌介导法转化菜心,并通过分子检测证实得到了23株转基因植株。
反义RNA技术沉默的白菜脂质转移蛋白基因导致了菜心转基因植株的部分花粉发育不良,转基因植株的花粉部分畸形、空瘪。花粉离体萌发率降低。表明该基因在普通白菜和菜心等花粉发育中起着重要作用。

关键词: 白菜, 雄性不育, 脂质转移蛋白, 基因