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园艺学报 ›› 2009, Vol. 36 ›› Issue (S): 1952-1952.

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大白菜与结球甘蓝单体异附加系的创建与分析

申书兴;王彦华;顾爱侠;轩淑欣   

  1. (河北农业大学园艺学院,河北保定 071001)
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2009-12-26 发布日期:2009-12-26

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2009-12-26 Published:2009-12-26

摘要: 单体异附加系与携带整套外源染色体的双二倍体相比,携有的不利基因和非目的基因较少,便于筛选具有外源有用性状的优良重组体,〖JP2〗实现作物的品种改良,是创制携有外源有用性状,遗传稳定的异代换系和易位系的桥梁材料;同时异附加系为特定的基因表达,基因的染色体定位,确定连锁群与染色体的对应关系、建立特定染色体的DNA文库等研究提供了条件。目前异附加系已在小麦、水稻、烟草、甜菜、番茄、马铃薯等作物上成功合成,但对于原产我国的大白菜和结球甘蓝尚无这方面的报道。试验材料为四倍体大白菜品系9402,结球甘蓝二倍体自交系9501;大白菜二倍体品系0558,结球甘蓝四倍体自交系9502;7个大白菜商品品种,8个结球甘蓝商品品种。通过胚挽救技术合成大白菜与结球甘蓝的种间杂交种AAC、ACC,利用根尖染色体计数法、SSR标记和形态学观察鉴定真假杂交种。以种间杂交种(ACC)为材料,分别采用大白菜与结球甘蓝基因组总DNA为封阻。探针标记采用DIGNick Translation Mix。染色体制片采用去壁低渗—火焰干燥法。利用回交法合成大白菜—结球甘蓝异附加系和结球甘蓝—大白菜异附加系。利用形态学、结合FISH的核型分析以及连锁群特异SSR标记鉴定异附加系。试验结果表明,改良White培养基为种间杂交胚挽救的适宜培养基,获得了大白菜与结球甘蓝的杂交种AAC(2n=29)、ACC(2n=28),SSR鉴定均扩增出父本特征带,表明杂交种为真杂交种。即使加入充足的封阻DNA也不能以杂交信号的有无区分大白菜与结球甘蓝染色体;加入适量的封阻DNA时,结球甘蓝染色体和大白菜染色体杂交信号的强弱存在差别。表明大白菜基因组和结球甘蓝基因组的同源性较高。以7个大白菜商品品种,8个结球甘蓝商品品种为材料,利用定位于结球甘篮、大白菜连锁群的SSR标记,筛选获得了25个结球甘蓝相对于大白菜特异的SSR标记;36个大白菜相对于结球甘蓝特异的SSR标记,为单体异附加系的鉴定奠定了基础。在回交一代群体中利用根尖染色体计数法筛选异附加系。大白菜—结球甘蓝单体异附加系:利用25S rDNA为探针,根尖有丝分裂的FISH鉴定了附加结球甘蓝1号、5号染色体的大白菜单体异附加系,分别记作AAC1,AAC5。利用25个甘蓝连锁群相对于大白菜特异的SSR标记鉴定AAC1,AAC5,结果表明这2个单体异附加系分别附加了甘蓝的O3,O7连锁群;利用甘蓝连锁群相对于大白菜特异的SSR标记筛选获得了附加甘蓝O2、O5、O6、O8连锁群的大白菜单体异附加系;同时鉴定筛选了部分双单体异附加系,为获得整套的结球甘蓝—大白菜单体异附加系奠定了基础。